CD11C~+CD45RA~-髓样树突状细胞、CD11C~+CD45RA~+浆细胞样树突状细胞在泡球蚴感染小鼠中的动态变化

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目的:观察泡球蚴(Em)感染Balb/c小鼠脾脏和淋巴结CD11C+CD45RA-髓样树突状细胞(mDC)和CD11C+CD45RA+淋巴样树突状细胞(pDC)及脾脏DC分泌的IL-12、IFN-γ的动态变化,揭示树突状细胞在泡型包虫病发生中的作用与机制。方法:80只健康雌性Balb/c小鼠随机取20小鼠做感染率检测,其余60只随机分为实验组和健康对照组,每组30只,实验组腹腔注射活原头节悬液0.2ml/只(约含400个原头节),对照组腹腔注射等量生理盐水,分别于接种后2d、8d、30d、90d、180d、360d各处死5只小鼠,无菌取各组脾脏和淋巴结常规方法制备细胞悬液,用流式细胞术检测脾脏CD11C+CD45RA-mDC、 CD11C+CD45RA+pDC、淋巴结CD11C+CD45RA-mDC、CD11C+CD45RA+pDC百分含量;将脾脏DC进行纯化和培养,ELISA法检测培养上清中IL-12、IFN-γ的含量;结果:1)Em感染小鼠90d,可见明显泡球蚴囊泡组织,感染后360d,泡球蚴病灶遍布肝脏各叶;2)Em感染小鼠2d、8d、30d、90d、180d脾脏mDC、淋巴结mDC百分比显著高于对照组(P<0.01),其中在感染2d-90d过程中缓慢上升,90d达到峰值,之后迅速降低,至感染360d后,脾脏mDC百分比与对照组相比无明显差异(P>0.05),淋巴结mDC百分比显著低于对照组(P<0.01);3)Em感染小鼠2d后,脾脏pDC百分比与对照组相比无差异性变化(P>0.05);感染2d、8d后,淋巴结pDC百分比与对照组相比无明显差异(P>0.05);感染30d后,脾脏、淋巴结pDC百分比急剧上升,90d达到峰值,之后缓慢下降,至感染180d、360d仍处于较高水平,显著高于对照组(P<0.01);4)脾脏、淋巴结mDC/pDC比值在感染2d、8d、30d后高于对照组,在感染90d、180d、360d后低于对照组,各时段mDC/pDC比值变化均有统计学差异(P<0.05)。5)Em感染小鼠脾脏DC培养上清液中IFN-γ和IL-12水平始终高于对照组,有统计学差异(P<0.05),随泡球蚴感染时间呈先上升再下降趋势,90d达到峰值。结论:泡球蚴感染早期,mDC表达水平增高,促进细胞免疫应答,介导免疫保护,在抵抗早期泡球蚴的发生和发展和清除虫体中发挥作用,泡球蚴感染中晚期,pDC表达水平增高,诱导和维持机体免疫耐受,有利于包虫在体内的生长,使之慢性化;DC分泌的IL-12和IFN-γ随DC表达水平和功能发生变化,参与泡球蚴进入体内后的免疫过程,在增强宿主免疫力和抑制包虫生长过程中发挥重要的免疫调节作用。
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