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研究脂肪细胞去分化和再分化的分子机制，关系到人类肥胖的防治策略和提高动物的生产效率。本研究主要采用“天花板”细胞培养法、流式细胞术、体外成脂诱导术、油红O提取法检测术、RT-PCR等技术，分离和纯化了猪去分化成熟脂肪细胞(dedifferentiated fat cells，DFAT)，鉴定了细胞表面抗原，诱导成脂再分化，检测了成脂再分化程度，并对成脂再分化过程中Krüppel样因子2(KLF2)和过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome proliferators-activated receptors，PPARγ) mRNA的表达模式进行了检测；在此基础上，进行了姜黄素对猪DFAT细胞成脂再分化能力及KLF2和PPARγmRNA表达模式的影响研究。 本研究主要内容包括：⑴采集健康仔猪背部皮下脂肪组织，采用“天花板”培养法进行原代培养，用贴壁的原代细胞进行传代培养，获得纯度较高的DFAT细胞。取F3代的DFAT细胞，用流式细胞仪检测细胞表面抗原。结果显示，间充质干细胞特异表达表面抗原CD44、CD29和CD105表达量分别为97.8%、99.0%和99.5%，而造血干细胞特异表达表面抗原CD45和CD34的表达量仅为3.55%和4.55%。这些结果表明，本研究获得纯度较高DFAT细胞。⑵取F4代DFAT细胞用成脂诱导培养液连续诱导21 d，用形态学观察和油红O染色法提取法检测成脂分化程度，用RT-PCR检测KLF2和 PPARγmRNA表达模式。结果显示，在诱导分化第2d胞内有细小脂滴出现，随诱导时间的延长含脂滴细胞数和脂滴量都逐渐增加，诱导分化第12 d，成脂分化率达80%以上；诱导分化第2 d、5 d、10 d和15 d的KLF2相对表达量（以0天为对照）分别为0.47±0.02、0.35±0.07、0.31±0.09和0.11±0.07倍，PPARγ的相对表达量分别为1.62±0.01、2.03±0.04、3.22±0.04和3.49±0.06倍。这些结果表明，猪DFAT细胞具有非常高的成脂分化潜能；KLF2在成脂分化启动期表达量高，随后逐步下调，说明KLF2是DFAT细胞成脂再分化启动早期的重要转录因子；PPARγ在整个分化过程中逐步增加，到第12 d之后趋于稳定没有下调，说明PPARγ是贯穿整个成脂分化过程中的关键转录因子。⑶取F4代猪DFAT细胞，当细胞汇合度达80%时，分别用含0、1、5、10、15、20和25μmol/L的姜黄素成脂诱导液作用24 h，然后置换成脂诱导液诱导分化，在诱导第10 d用油红O染色提取法检测细胞内脂肪含量。结果显示，所用所用浓度姜黄素均能显著抑制（P＜0.05）猪DFAT细胞的成脂分化，且其抑制作用随浓度的增加而增强，但25μmol/L姜黄素导致细胞部分死亡，因此选择20μmol/L姜黄素后期试验。⑷取F4代细胞，用20μmol/L姜黄素处理DFAT细胞，并分别诱导分化3 h、6 h、12 h、24 h、48 h，检测KLF2 mRNA的表达水平；同时，分别诱导分化2 d、5 d、10 d和15 d，检测 PPARγmRNA的表达水平。结果显示，姜黄素显著上调各检测时间点KLF2 mRNA的表达水平，上调率分别达到380.36%、42.36%、21.41%、186.65%和143.91%；相反，姜黄素显著下调各检测时间点PPARγmRNA的表达水平，表达抑制率分别为29.45%、27.91%、32.72%和33.14%。这些结果表明，姜黄素抑制猪DFAT细胞的成脂再分化，与姜黄素上调KLF2的mRNA的表达与下调PPARγmRNA的表达相关，说明猪DFAT细胞成脂再分化过程中， KLF2是成脂再分化启动时期的负调控转录因子，而PPARγmRNA是贯穿整个成脂再分化过程的正调控转录因子。