海藻酸钙膜与NGF-BMG复合体修复兔骨缺损的实验研究

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目的:本研究利用新兴的引导性骨再生技术,将海藻酸钙膜与复合神经生长因子的骨基质明胶联合应用,综合骨引导、骨传导、骨诱导作用及神经生长因子对骨再生的作用,促进骨缺损的修复。旨在观察神经生长因子直接用于骨缺损区对骨组织再生的作用和形式;明确骨基质明胶作为神经生长因子缓释体的可行性,并探讨神经生长因子和膜引导组织再生技术联合应用对骨再生的作用效果。为临床修复骨缺损探索一条有效的途径。方法:1.神经生长因子-骨基质明胶复合体体内释药的实验研究将骨基质明胶(BMG)溶于神经生长因子[NGF(20μg)]溶液,通过真空吸附、冻干等处理,制得NGF-BMG复合体。用酶联免疫吸附实验检测NGF-BMG复合体在兔体内释药浓度及持续时间。2.海藻酸钙膜与神经生长因子-骨基质明胶复合体修复兔骨缺损的实验研究24只成年雄性新西兰兔,随机分成4组,每组6只,制成双侧10mm桡骨缺损模型,A组骨缺损处植入NGF-BMG复合体,外包裹海藻酸钙膜;B组骨缺损处植入BMG,外包裹海藻酸钙膜;C组骨缺损区包裹海藻酸钙膜,膜管内注入NGF 20μg;D组骨缺损区包裹海藻酸钙膜,缺损区内不作处理。分别于术后第4、8、12周随机处死动物,每组每批处死2只,作下列检测:形态学观察、组织学观察、X线检查及生物力学检测(12周)。采用SPSS13.0软件包对4组组织学切片、X线片和生物力学检测结果进行统计分析。结果:1.NGF-BMG复合体在兔体内释放NGF时,局部组织浓度高,血浆浓度低。局部组织早期(1天内)浓度高,以后维持低浓度稳定释放(14天以上)。2.在X线片骨密度、组织学切片成骨面积和生物力学检测方面,A组均优于B、C、D组,具有统计学意义(P<0.01)。结论:1.NGF-BMG复合体既能持续释放有效浓度的NGF,又具有良好的修复骨缺损的能力。两者联合使用,促进骨缺损修复的作用明显优于单独使用NGF和BMG;2.NGF-BMG复合体具有良好的生物相容性,置换速度和程度与组织再生完成时间相匹配;3.NGF具有促进骨再生的作用,但NGF半衰期短,易受温度、酸碱等多种因素的影响,单独使用很难在骨缺损局部达到有效浓度,严重阻碍NGF疗效的发挥;4.骨基质明胶不但是NGF的合适载体,而且具有骨诱导活性,是维持膜下空间的理想材料;5.海藻酸钙膜具有很好的组织相容性、可降解性,是半透膜,允许组织液与各种营养物质在细胞间进行交换、转运,为局部细胞增殖分化、生长因子的聚集及释放,各种营养物质的合成创造了物质条件。
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