中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子低温保存的研究

来源 :华东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:syameimaruda
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1、保存液及保存条件对中华绒螯蟹精子存活率的影响 在低温(4℃)下对中华绒螯蟹精子进行体外保存研究,探讨了六种保存液对精子体外保存中存活率的影响。以伊红染色法检测样品活精子率,并结合保存液中的精子密度的变化来评价保存液的保存效果。结果显示,六种保存液中海水等渗KCl溶液和海水等渗葡萄糖溶液的保存效果最差,保存2d后精子即全部死亡,而两种无钙离子人工海水的保存效果较好,其中以无钙离子人工海水Ⅱ的效果尤佳,其保存6d后的活精子率达92.19%,精子密度亦保持较高水平;表明无钙离子人工海水Ⅱ是中华绒螯蟹精子短期体外保存的理想保存液。此外,在对该蟹精子体外保存过程中的精子密度、保存液pH值和渗透压条件的研究中发现,以无钙离子人工海水Ⅱ作保存液,不同精子密度的保存效果差异显著,其中以106~107个/mL的保存密度效果最好,在保存2d后其活精子率仍保持在95%以上;而保存液pH条件的研究发现,在pH7~10的范围内,保存15d后的活精子率均在90%以上;在以NaCl配制的渗透压范围为500~1000mOsmol/kgH2O的10个梯度保存液中,以750~850mOsmol/kg H2O的保存液保存效果最好,该条件下保存15d后其活精子率仍在75%以上;以上结果证实,中华绒螯蟹精子适宜的保存条件为:精子密度为106~107个/mL,渗透压范围为750~850mOsmol/kg H2O,pH范围为pH 7—10。 2、Ca2+、Mg2+、K+对河蟹精子体外保存效果的影响 以ASW(人工海水)为基础,在低温(4℃)下对河蟹精子进行体外保存的研究,探讨ASW中几种阳离子成分对河蟹精子保存质量的影响,分别配制了人工海水(ASW),2倍钙离子人工海水(2×Ca2+-ASW),无镁离子人工海水(Mg2+FASW),无钾离子人工海水(K+FASW),无钙离子人工海水(Ca2+FASW),以伊红染色法检测样品活精子率,并结合保存液中的精子密度的变化来评价保存液的保存效果。扫描电镜和透射电镜辅助观察保存后的精子的超微结构。在此基础上重点探讨不同含量的Mg2+和Ca2+对精子质量的影响。结果表明K-FASW、ASW及
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