目的:通过检测三氧化二砷（As₂O₃）对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株的增殖抑制,诱导凋亡作用及对细胞周期的影响,探讨As₂O₃对人皮肤T细胞淋巴瘤的作用及可能的作用机制。方法:本课题分别采用MTT,PI单标记流式细胞术和TUNEL方法检测不同时间组,作用浓度分别为2、5、10μmol/L的As₂O₃对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株的增殖抑制,诱导凋亡作用及其对细胞周期的影响;采用RT-PCR方法检测不同时间组,作用浓度分别为2、5、10μmol/L的As₂O₃对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株作用后凋亡相关基因bcl-2基因及内皮生长因子VEGF基因表达的变化。结果:1.在2-10μmol/L As₂O₃的浓度范围内,随药物浓度的增加及作用时间延长,Hut-78细胞的生长受抑制程度逐渐增加。作用浓度为2μmol/L时,各时间组抑制率均较低,作用浓度为10μmol/L,时间为72小时时,抑制率最高达到64.16±6.65%。2.流式细胞仪分析细胞DNA的含量结果显示,Hut-78细胞经As₂O₃作用后,各浓度梯度在24小时时亚二倍体峰均不明显,在48及72小时即有明显亚二倍体峰出现。3.以2-10μmol/L浓度的As₂O₃分别干预Hut-78细胞48、72小时,流式细胞仪分析各期细胞占细胞周期的比例,结果未经As₂O₃作用的细胞其细胞周期中G0-G1期的细胞占较高比例,As₂O₃干预后被阻滞在G2-M期的细胞随着As₂O₃时间及浓度的增加比例逐渐增大,10μmol/L作用72小时时G2-M期比例最高。4.以2-10μmol/L浓度As₂O₃分别干预Hut-78细胞48、72小时,采用Tunel方法检测,各加药组均出现棕褐色的凋亡细胞,随着浓度增加及作用时间延长作用强度也逐渐变化,48小时2μmol/L时凋亡率及坏死率最低,72小时10μmol/L时达最高。5.在As₂O₃ 2、5、10μmol/L三组不同浓度的作用下,用RT-PCR方法观察不同作用时间下Hut-78细胞中BCl-2基因及VEGF基因的表达水平,结果显示随As₂O₃浓度的增高及作用时间的延长,BCl-2基因及VEGF基因的表达量呈逐渐下降趋势。结论:在一定的浓度范围内,As₂O₃对Hut-78细胞存在增殖抑制作用,其增殖抑制作用在一定程度上可能与下调VEGF基因的表达有关,同时还存在一定的细胞毒作用:As₂O₃可诱导Hut-78细胞发生凋亡,凋亡机制主要发生在G2-M期,其凋亡作用可能与下调bcl-2基因表达有关。As₂O₃对Hut-78细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用呈时间剂量依赖性。