论文部分内容阅读
纳米脂质体因独具特性被作为载体而广受关注与研究。但因其磷脂易被氧化、易融合聚集等不稳定因素使得药物容易泄露,同时脂质体本身缺乏主动靶向性,从而使得它的使用受到限制。从姜黄中提取出来的姜黄素具有广谱生理活性,但因水溶性差、对光及热等不利的环境极为敏感,它的生物利用率并不高。研究表明,采用脂质体技术将姜黄素包载起来,可以在很大程度上提高姜黄素的生物利用率。为了进一步提高姜黄素脂质体的物理稳定性,缓释性,细胞摄取率,本实验将叶酸与壳聚糖偶合,叶酸-壳聚糖通过静电相互作用力包覆在姜黄素脂质体表面,从而形成叶酸-壳聚糖姜黄素纳米脂质体。随后考察修饰前后两种脂质体的储存稳定性、缓释性及结肠癌细胞对两者的摄取。本文以1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳乙二胺盐酸盐（EDC）与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）为催化剂,反应合成叶酸-壳聚糖复合物。之后采用红外光谱法检测反应产物的官能团。结果显示,叶酸壳聚糖在1656cm-1及1606 cm-1处出现了吸收峰,它们分别代表壳聚糖与叶酸的特征峰,这表明叶酸与壳聚糖偶联成功。通过薄膜分散法结合动态高压微射流法制备的姜黄素纳米脂质体,脂质体粒径为67.4±3.4 nm,电位为-13.81±2.75 mv,而脂质体经叶酸壳聚糖修饰后,粒径变为103.6±4.1 nm,电位变为16.35±3.54 mv。在体外释放实验中,弱碱性的条件下,叶酸-壳聚糖修饰后的脂质体显示出更佳的缓释性（24 h释药17.7%）。在25℃的条件下储存4周后,两种脂质体的粒径及电位的变化较小,但修饰后的脂质体显示出更好的药物保护性。同时,考察姜黄素脂质体与叶酸-壳聚糖修饰姜黄素脂质体与结肠癌细胞的亲和性。MTT比色法结果显示,细胞毒性随药物浓度升高而增大,在药物浓度为80μg/mL时,叶酸-壳聚糖姜黄素脂质体实验组的细胞存活率仅为26%,而姜黄素脂质体实验组的细胞存活率为38%。随着药物浓度的增加,两者间的毒性差距加大。倒置显微镜观察不同药物浓度作用下的细胞形态,随着药物浓度的增加,细胞碎片增多,细胞形态无规则。利用姜黄素本身发荧光的性质,用荧光倒置显微镜观察药物作用结肠癌细胞6h后细胞摄取脂质体的状况,结果显示,修饰后的脂质体实验组显示出更强的荧光。综上所述,叶酸-壳聚糖修饰的姜黄素脂质体在一定的程度上提高了脂质体的稳定性、缓释性及结肠癌细胞对脂质体的摄取率,进一步提高了姜黄素的利用价值。