电针对拟血管性痴呆大鼠海马JNK信号通路的影响

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目的:观察电针对拟血管性痴呆(Vascular Dementia,VD)大鼠的行为学、海马CA1区病理形态学以及海马区凋亡相关蛋白JNK和p-JNK、Caspase-3、Caspase-8表达的影响,探讨电针对VD的干预效应、作用机制及与频率的相关性,为针灸临床治疗VD提供客观依据。方法:使用双侧颈总动脉(Common Carotid Arteries,CCA)反复缺血再灌注的方法制备拟VD大鼠模型。造模后将存活的模型大鼠随机分为模型组、尼莫地平组、2Hz电针组、100Hz电针组及2/100Hz电针组。电针组选取“大椎”“百会”“后三里”(双)“膈俞”(双)穴,接电针分别施以2Hz、100Hz及2/100Hz刺激。造模后第17d进行水迷宫实验检测大鼠行为学,尼氏染色观察大鼠海马区形态学,TUNEL法检测神经元凋亡,Western Blot检测大鼠海马JNK、p-JNK、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达。结果:1.行为学测试:模型组大鼠逃避潜伏期较假手术组明显延长且穿越虚拟平台次数明显减少(P<0.01);与模型组相比各治疗组均可缩短逃避潜伏期(P<0.01)。2.病理形态学观察:假手术组海马区细胞形态完整,尼氏小体丰富,模型组细胞疏松杂乱,尼氏小体明显减少,各治疗组尼氏小体较模型组相对增多,神经元细胞形态也有一定改善。3.TUNEL染色观察:假手术组TUNEL阳性细胞表达不明显,模型组凋亡阳性细胞表达明显增加,各治疗组凋亡细胞表达较模型组减少。4.Western Blot检测:与模型组相比各治疗组均可降低JNK、p-JNK、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达(P<0.01)。其中,各电针组降低JNK蛋白表达无显著性差异(P>0.05);2Hz组与2/100Hz组降低p-JNK、Caspase-8蛋白表达效应优于100Hz组(P<0.01);2/100Hz组降低Caspase-3蛋白表达效应优于2Hz组和100Hz组(P<0.05,P<0.01)。结论:电针可明显减轻脑缺血再灌注对拟VD模型大鼠的海马神经细胞造成的病理损伤,提高模型大鼠的学习记忆能力。其作用机制可能与电针降低JNK、p-JNK、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达,抑制模型大鼠海马区神经细胞JNK通路介导的细胞凋亡,改善中枢神经系统功能有关,且电针不同频率对不同蛋白表达的干预效应存在一定差异。
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