论文部分内容阅读
目的：研究依达拉奉对百草枯中毒的保护作用,并探讨其可能机制。方法：1.通过临床实验研究,观察依达拉奉对急性百草枯(Paraquat PQ)中毒患者超敏C-反应蛋白(High sensitive C-reactive protein, Hs-CRP)的影响及其临床意义,并探讨hs-CRP与中毒程度及预后的关系。将急性百草枯中毒患者分为常规治疗组(简称对照组)及依达拉奉治疗组(简称治疗组),另外将对照组、治疗组患者再分为多器官功障碍综合症(MODS)组和非MODS组。于入院当天及治疗后第3,7,14,21天分别抽取外周静脉血检测hs-CRP水平。2.建立百草枯诱导的帕金森病(Parkinson’s disease PD)小鼠模型,观察依达拉奉对百草枯诱导多巴胺能神经元细胞凋亡的保护作用。选用8周龄C57BL/6小鼠110只随机分为阴性对照组,依达拉奉对照组,百草枯组,依达拉奉保护组,除阴性对照组和依达拉奉对照组外,每组均按1Omg/kg给予百草枯经腹腔注射,生理盐水为阴性对照组,依达拉奉给予保护措施,观察小鼠行为学改变,是否出现类帕金森病症状,8周后处死小鼠取出中脑组织,采用HE染色观察中脑黑质神经元细胞变化,应用免疫组织化学法测定Caspase-3表达情况,应用流式细胞仪检测各组小鼠脑细胞凋亡情况。所得结果采用方差分析进行统计学分析。结果：1.临床实验研究显示：两组患者治疗前hs-CRP水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗3,7,14,21天后,两组患者hs-CRP均明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)；但依达拉奉治疗组升高不明显(P<0.01),两组患者中的MODS组与非MODS组hs-CRP水平比较差异有统计学意义(P<0.01)。2.动物实验研究：(1)行为学改变：与阴性对照组相比,百草枯组出现明显震颤、动作减少和缓慢等帕金森样症状。(2)脑组织病理学变化：阴性对照组与依达拉奉对照组多巴胺能神经元分布均匀,形态学大多正常；百草枯组示多巴胺能神经元数量显著减少,密度降低,可发现大量凋亡、坏死的神经元细胞,可能原因是百草枯对中脑多巴胺能神经元有一定的破坏作用；与百草枯组比较依达拉奉治疗组多巴胺能神经元细胞数量减少不明显,有小量凋亡、坏死的神经元细胞,表明依达拉奉可以在一定程度上阻止多巴胺能神经元的变性丢失。(3)免疫组织化学实验：百草枯组中脑黑质致密部Caspase-3阳性细胞比例较阴性及依达拉奉对照组明显增加(P<0.01),而这种激活可被依达拉奉所抑制,与百草枯组相比,依达拉奉治疗组Caspase-3阳性细胞比例降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。(4)细胞凋亡结果显示：与阴性对照组小鼠脑细胞凋亡率比较,依达拉奉对照组脑细胞凋亡率无明显差异(P>0.05),百草枯模型组小鼠脑细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),依达拉奉治疗组小鼠脑细胞凋亡率升高,差异也有统计学意义(P<0.01)；与百草枯模型组比较,依达拉奉治疗组小鼠脑细胞凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)结论：1.Hs-CRP可作为百草枯中毒患者病情程度的观察指标,血清hs-CRP水平与中毒后MODS的发生关系密切,依达拉奉可降低急性百草枯中毒患者hs-CRP水平,对急性百草枯中毒具有明显的治疗作用。2.百草枯可诱导C57BL/6小鼠出现类帕金森病症状,使中脑黑质部多巴胺能神经元数目减少,依达拉奉对百草枯诱导的PD小鼠有一定的保护作用,可减轻百草枯中毒后所致的弥漫性脑损伤,依达拉奉可能通过抑制百草枯诱导的黑质DA能神经元细胞凋亡而起到保护作用,其机制有待于进一步探讨。