论文部分内容阅读
目的:将脑源性神经生长因子(BrainDerivedNeurotrophicFactor,BDNF)和神经干细胞(Neuralstemcells,NSCs)移植单独及联合应用于MCAo模型大鼠,探讨BDNF和NSCs移植对缺血性脑卒中的作用。
方法:体外分离、培养新生大鼠海马NSCs,Brdu标记,并用胎牛血清诱导,观察其分化。将实验动物分为A组(单纯MCAo组);B组(MCAo+BDNF组);C组(MCAo+NSCs组);D组(MCAo+BDNF+NSCs组),B、C、D组在MCAo后24h将BDNF或NSCs注入梗死同侧侧脑室内,移植后在不同时间对大鼠进行神经功能评分后处死大鼠,视交叉后连续切片,进行BrdU、Nestin、BrdU/NSE、BrdU/GFAP免疫组化及荧光染色,对以上结果进行统计学分析。以观察BDNF对内源性NSCs和外源性NSCs的增殖、迁移及分化的影响。
结果:分离培养的海马NSC表达Nestin抗原,并有自我更新及多向分化潜能。经BrdU标记后,大部分NSCs表达Brdu抗原。移植后2w、4w,D组功能评分显著好于其它三组,B组与C组显著好于A组。B组在MCAo后在侧脑室室管膜下区(SVZ)、海马齿状回(DG)和梗死灶周边BrdU、Nestin阳性细胞数显著多于A组。D组移植后在缺血区周围出现的BrdU、Nestin阳性细胞数量及BrdU/NSE双标阳性细胞的数量显著多于C组。
结论:分离培养的大鼠海马NSCs在体外自然分化时大部分分化为神经胶质细胞,少部分分化为神经元。BDNF和NSCs移植单独及联合应用对MCAo大鼠的神经功能恢复均有作用,二者联合具有协同作用。BDNF对内源性NSCs的激活、增殖有促进作用,对外源性NSCs的增殖、迁移及分化有促进作用。