组蛋白去乙酰化酶4和血管内皮生长因子受体-1对肝癌细胞株HepG2侵袭转移影响的研究

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第一部HDAC4、VEGFR-1在肝癌细胞株HepG2的表达目的:研究HDAC4和VEGFR-1在肝癌细胞株HepG2中的表达方法:体外培养肝癌细胞株HepG2,用免疫细胞化学的方法及Western-blotting检测HDAC4、VEGFR-1表达。结果:免疫细胞化学试验显示,HDAC4蛋白阳性表达呈棕色颗粒,主要位于细胞核,胞浆也有表达。VEGFR-1蛋白阳性表达呈浅棕色颗粒,位于细胞浆。Western-blotting方法显示,HDAC4、VEGFR-1均有条带显示其在肝癌细胞株HepG2中表达。结论:HDAC4及VEGFR-1在肝癌细胞株HepG2中有表达第二部分:HDAC4、VEGFR-1之间的相互影响目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Histone deacetylase inhibitors, HDACI)苯丁酸钠(SPB)作用于肝癌细胞株HepG2后,HDAC4、VEGFR-1之间的相互影响。方法:体外培养肝癌细胞株HepG2经SPB作用后,用免疫细胞化学的方法及Western-blotting观察HDAC、VEGFR-1之间的变化。结果:免疫细胞化学显示SPB作用24h后,HDAC4蛋白表达较无药物作用时弱,VEGFR-1蛋白表达较无药物作用时弱,阳性细胞数减少;Western-blotting显示经SPB作用后,HDAC4表达下调,而VEGFR-1表达也相应的下调,呈现剂量-时间依赖关系。结论:HDACI作用于肝癌细胞株HepG2后,HDAC4的表达受到抑制,VEGFR-1的表达下调。说明HDACI可能抑制HDAC4、VEGFR-1的表达。第三部分:HDAC4抑制剂SPB对肝癌细胞株HepG2侵袭、转移及黏附的影响目的:观察HDAC4抑制剂SPB对肝癌细胞株HepG2侵袭黏附的影响方法:应用transwell小室观察HDAC抑制剂SPB对肝癌细胞株HepG2侵袭、转移的影响作用,应用MTT方法测定HDAC抑制剂SPB对HepG2的粘附作用的影响。结果:应用transwell小室观察经SPB作用后,处理组、对照组细胞的穿膜细胞的数分别为161.80±46.796、329.20±55.993,抑制率达到50.85%,有显著统计学意义(ρ<0.01 vs对照);MTT方法测定粘附作用显示SPB处理组细胞的粘附率较未处理组明显下降(ρ<0.01 vs对照)结论:HDAC4抑制剂SPB可以抑制肝癌细胞株HepG2的侵袭、转移及黏附,并有显著的意义。HDAC4与肝癌的上述生物学行为有关。
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