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从天然植物中提取药物自古是人类获得药物的主要途径,车前草作为古老的传统中药,临床应用时间比较长,应用也非常广泛,但对车前草研究大多只停留在粗提物的研究,尚未深入到活性成分的研究。
本实验旨在研究:(1)利用超声波辅助提取车前草多糖的优化工艺条件:(2)对提取的车前草的多种成分进行分离;(3)对分离得到的新成分进行表征。
论文共分四章:
第一章:综述了车前的本草、生药、成分、药理、成分的提取方法等方面的研究进展。
第二章:通过单因素实验和正交实验对提取时间、提取温度和超声波提取功率进行考察,确定了超声波辅助提取车前草多糖的优化工艺条件。本实验采用溶剂提取法中的浸取法结合超声提取,用乙醇做提取剂,得到乙醇浸膏,通过单因素试验和L9(33)正交试验对超声波辅助提取车前草多糖的工艺进行了优化。结果表明:影响超声波辅助提取车前草多糖的主要因素为超声波功率,其次是超声波提取温度,再次是超声处理时间;优选方案为超声提取温度70℃,超声处理时间为2.0h,超声波功率为400w。
第三章:通过柱色谱法,利用硅胶做固定相,石油醚及乙酸乙酯做溶剂,经过对药物的洗脱得到各种成分,对于初步获得的车前草的乙醇浸膏中的化学成分,用旋转蒸发器浓缩后再依次用石油醚、丙酮、正丁醇萃取。并选择石油醚萃取物作进一步分离,用柱色谱法洗脱其中的化学成分使其成分得到分离,在薄层色谱板上可以看到分离的效果。本实验最终得到280种馏分,合并相同的馏分后得到129种不同馏分,选择样品量较多并且较纯的馏分重结晶纯化,又可得到40瓶更纯的馏分。
第四章:对分离出的车前草成分进行表征,在40瓶较纯的样品中,发现了前人未发现的两种结晶,其中一种为白色针状晶体,另一种为绿色针状晶体,对这两种晶体重结晶纯化后使用紫外光谱,红外光谱,核磁共振氢谱,核磁共振碳谱等手段鉴定其中的化学成分,各种方法的检测表明,我们得到了两种新单体其中一种为未见报道的新物质。并且初步测定前者(白色针状晶体)为甾体皂苷元类物质,后者(绿色针状晶体)与现已报道的各种物质均不相同,但是已经初步判定其具有对称结构,并且含有-OH、C=O、C=C-O、C-O-C、芳环等基团。