地耳草(Hypericum japonicum Thunb. ex Murray),属于藤黄科(Guttiferae)金丝桃属(Hypericum)的一种多年生草本植物,又名田基黄、小元宝草、四方草、千重楼(浙江)等,广泛分布于山东、辽宁以及长江以南等各个省区。在我国民间,地耳草的全草被用于清热解毒、止血消肿和治疗各种急慢性以及传染性肝炎、泻痢、胃肠功能紊乱和内出血等。在欧美等地区也有民间药用记载。地耳草的萃取液,也叫田基黄,具有抑菌、保肝护肝、抗肿瘤和预防心血管疾病等疗效,目前已有针剂应用于临床治疗急、慢性肝炎。本课题采用乙醇溶剂提取法,分别对湖北蕲春大别山地区和江西庐山地区产地耳草地上茎叶部分进行化学成分和药理活性研宄。采用了正相硅胶层析柱、ODS反相色谱柱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、半制备HPLC和半制备手性拆分等分离手段和方法,综合运用了1D&2D NMR、HRESIMS、 X-ray单晶衍射、IR和UV等多种现代波谱技术,并通过改良Mosher’s手性反应和Rh盐诱导ECD效应等化学反应方法,以及含时密度泛函理论(TD-DFT)计算ECD和量子化学理论计算并预测13C NMR化学位移等物理化学手段,鉴定了68个化合物的结构,其中有34个新化合物。这34个新化合物中： (1)有10个属于绵马酸骈合倍半萜类衍生物(其中有3对对映异构体和1对差向异构体),具有6/6/11,6/6/7/5和6/6/10三种新颖骨架,而且,这也是首次从藤黄科植物里发现具有这种类型的化合物,丰富了藤黄科植物次生代谢产物的类型；(2)有16个属于间苯三酚单萜类衍生物(为8对对映异构体),其中有3对化合物具有比较新颖的2-oxabicyclo[3.3.1 Jnonane, pyrano[3,2-6]pyran和benzo[6]cyclopenta[e]oxepine环系；(3)有4个化合物属于螺酮缩醇杂萜类化合物(为2对对映异构体), 具有比较新颖的1,6-dioxaspiro[4.4]non-2-en-4-one环系； (4)有1个为降倍半萜类； (5)有2个为新吡喃酮类化合物； (6)有1个为新木质素类化合物。我们对这34个新化合物进行了体外细胞毒活性(包括五种常见的人类肿瘤细胞株：SW480. MCF-7. A-549, SMMC-7721和HL-60-一种非肿瘤细胞株：BEAS-2B)抑制β淀粉样蛋白肽前体蛋白裂解酶(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1, BACE1)活性、NO生成抑制活性、对诱导期Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus, EB V)的DNA复制的抑制和抗卡波氏肉瘤相关病毒(kaposi’s sarcoma associated herpesvirus, KSHV)感染等多种生物活性筛选,其中间苯三酚倍半萜类化合物表现为普遍具有潜在的抗EBV活性,而且化合物3(EC50:0.57μM; SI:52.63)和化合物7(EC50:0.49μM; SI:106.78)表现出比目前最好的抗EBV药物更昔洛韦(EC50:2.86μM;SI:104.50)更强的活性,这也是首次发现间苯三酚倍半萜类衍生物具有针对EBV在裂解期进行DNA复制的抑制作用。而且,我们还初步探讨了这10种间苯三酚倍半萜衍生物在抗EBV活性中所表现出来的构效关系,结论是：光学活性为左旋体、具有绵马酸结构、倍半萜部分为大环且没有环外烯键(Δ5,14),而且绵马酸部分以C-5’-O-C-1联接方式骈合倍半萜部分的间苯三酚倍半萜衍生物,可能具有较高的抗EBV活性。此外,间苯三酚单萜类化合物表现为普遍具有潜在的抗KSHV活性,其中化合物28(EC50:8.30 μM; SI:23.49)和化合物34(EC50:4.90μM; SI:25.70)对于研发针对KSHV裂解期复制的抗感染药物具有相当的开发价值。藤黄科植物的次生代谢产物绝大多数为间苯三酚衍生物,而本课题分离鉴定的绵马酸骈合倍半萜型的间苯三酚衍生物,属三类新骨架化合物,在藤黄科植物里属首例发现。而且,我们还首次对间苯三酚衍生物进行了抑制EBV DNA复制和抗KSHV裂解期感染的评估,并且大部分化合物表现出潜在的药用开发价值。针对这些有开发价值的化合物,我们通过计算机反对接模拟模型和Microscale thermophoresis (MST)分析,初步探究了它们可能的作用机制。本课题还实现了总共13对新化合物的对映异构体拆分工作,每对拆分后的对映异构体的质量几近相等,对探究植物里代谢产物结构的非立体选择性和可能的非酶作用的代谢途径,具有重要意义。