电场对α—淀粉酶二级结构和酶活性的影响及其时间效应

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电场生物效应经过几十年的研究,宏观生物效应及应用方面取得了巨大的成功。电场作用于生物系统的什么成分,特别是电场对生物体处理的原初作用机理目前了解较少,电场生物效应的研究缺乏理论指导,这在一定程度上制约了目前电场生物效应的开发研究。   酶在生命活动中,扮演着极其重要的角色。酶蛋白的空间结构对酶的功能至关重要。Α-淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中,是一种重要的淀粉水解酶。本文以α-淀粉酶为研究对象,利用傅里叶变换红外光谱技术研究不同电场处理对α-淀粉酶二级结构的影响,分两次测定第一天及第七天电场对酶活性的影响。   实验研究结果表明:   1.不同强度电场作用于α-淀粉酶5min和10min后,无规卷曲结构含量显著下降,β-折叠结构含量显著增加,其它二级结构含量没有显著性变化。酶活性显著增加。无规卷曲结构有向β-折叠结构转化的趋势,即淀粉酶二级结构有序化增加。   2.经不同强度电场处理5min和10min后的α-淀粉酶放置第七天,二级结构含量与对照相比没有显著变化,酶活性与对照相比也没有显著变化。即电场处理所发生的效果趋于消失。   3.α-淀粉酶是一种含α-螺旋结构较多的蛋白质。电场处理使无规卷曲含量降低,促使无规卷曲向β-折叠结构转化。电场处理使α-淀粉酶活性增加,这与其β-折叠含量增加存在一定的相关性。   4.50Hz正弦波电场作用于α-淀粉酶,电场长时间作用较短时间作用更容易对α-淀粉酶产生明显的影响。   5.α-淀粉酶活性中心位于β-折叠结构上,β-折叠的多寡与α-淀粉酶活性存在相关性。   研究结果为阐明酶蛋白分子结构与功能之间的关系,解释外电场对生物体的作用机理提供了实验基础。
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