T、B淋巴细胞是适应性免疫的主要参与者，其在机体对抗外界病原体的生理过程中发挥着至关重要的作用。T、B淋巴细胞的抗原受体分子可变区胚系编码基因的重排决定了T、B细胞抗原受体分子的多样性。在抗原受体基因重排过程中，机体通过等位排斥来确保一个淋巴细胞只产生一种类型的抗原受体。尽管对等位排斥现象已进行了大量研究，但目前尚无在活体淋巴细胞中实时监测等位排斥发生过程的技术。为了实现对等位排斥的实时动态监测，我们以Tcrb基因的等位排斥作为切入点，在Tcrb等位染色体Vβ区分别引入荧光蛋白GFP(绿色)和tdTomato（红色），从而实现对等位排斥的实时活体监测，即当Tcrb等位基因发生重排时，染色质由异染色质变为常染色质，此时，荧光蛋白即可转录表达，荧光可见;而没有发生重排的Tcrb等位基因则不能启动荧光蛋白的表达，荧光不可见。基于上述设计，我们构建了Tcrb荧光敲入小鼠的胚胎干细胞系，并在体外对荧光功能进行了检测，接下来，我们将进一步采用该干细胞系来构建小鼠。我们希望通过该小鼠模型来实时监测原代T细胞基因重排过程中等位染色体上等位基因参与重排的情况，从而还原等位排斥的真实发生过程。