主要功能性低聚糖关键组分研究

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功能性低聚糖具有促进机体肠道有益菌群生长、预防龋齿、低糖分低热量的功效与特点,在日化、食品、保健品和环境等领域应用非常广泛。与普通低聚糖相比,这些功能性低聚糖中的关键组分具有特殊的结构以及其独特的生理活性。而获得这些关键组分的单体纯品,对功能性低聚糖的进一步研究与工业化生产具有定性判定与定量分析的重要作用。但由于受制备工艺以及分离纯化方法的制约,这些组分不易得到,并且在国内市面上难以购得。因此,从功能性低聚糖中制备高纯度的关键组分的标准品具有其特殊的现实意义。首先,对低聚异麦芽糖粗糖液的制备工艺进行了优化,建立了投酶量150 U/g,底物浓度20%(w/v)在pH 5.0、55℃下反应21 h的最佳反应条件,并初步优化了利用大孔树脂去除低聚异麦芽糖粗糖液中蛋白的过程。再通过薄层色谱和高效液相色谱法对低聚异麦芽糖中的组分进行了定性分析。最后,采用高效液相色谱法对潘糖进行分离纯化,得到的潘糖纯度为98.43%,收率为49.22%。其次,本课题还对低聚果糖的制备工艺进行了探究,首先采用酒精沉降的方法将菊芋果聚糖的大分子物质进行沉淀,再将上清液用菊粉内切酶进行逐级酶解。结果表明:菊糖溶液先经过85%酒精30 min的沉降作用可得到聚合度≤8的低聚果糖。再通过菊粉内切酶作用6 h可得到聚合度≤5的低聚果糖,10 h后生成的三糖组分含量最高。接着,对制备液相的分离条件进行了优化,最终按时间对果果三糖流分进行收集,可得到纯度为99.99%的果果三糖。最后,以所制备的潘糖与果果三糖纯品作为标准品,可对α-葡萄糖苷酶解过程中潘糖含量以及菊芋酶解过程中果果三糖含量的变化情况进行实时监控。这为这两种关键组分的开发与应用奠定了基础。也为其它功能性低聚糖中关键功能组分的分离纯化提供了技术支持。
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