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植酸酶可以提高饲料中磷的利用率和减少粪便中磷的排出量，对减少畜禽粪便中磷对环境的污染和提高饲料利用率有重大价值，提高植酸酶的表达量，对工业化生产有重要意义。 本研究以本课题组构建的植酸酶毕赤酵母基因工程菌PP-NPm-8和PP-NPm-4-8为出发菌株，根据毕赤酵母的信号肽序列，按照酵母偏爱密码，人工合成毕赤酵母的新型信号肽MS，并构建了新型酵母表达载体pPIC9k-MS，并进行了酶切鉴定。将本课题组来源于黑曲霉N25植酸酶phyA基因的突变基因phyAm和突变基因phyAm-4分别插入pPCI9K-MS载体中，构建重组质粒pPIC9k-MS-phyAm和pPIC9k-MS-phyAm-4，并进行PCR鉴定，然后电击转化毕赤酵母，筛选获得了植酸酶毕赤酵母基因工程菌株PP-MS-NPm-77和PP-MS-NPm-4-16。 植酸酶毕赤酵母基因工程菌PP-MS-NPm-77和PP-MS-NPm-4-16表达产物的SDS-PAGE分析表明，酶蛋白分子大小为70.15KD。PCR鉴定结果表明，突变基因phyAm和突变基因phyAm-4都已整合到酵母染色体DNA中。连续传10代培养实验证实，植酸酶毕赤酵母基因工程菌的遗传稳定。 植酸酶毕赤酵母基因工程菌PP-MS-NPm-77酶活性测定结果表明，在BMGY／BMMY培养基中诱导36h后酶活力可达179150u／ml，比出发菌株PP-NPm-8的63667u／ml提高了2.81倍，在麦芽汁培养基中，诱导36h后酶活力达188130u／ml，比PP-NPm-8的47600u／ml提高了3.95倍。 植酸酶毕赤酵母基因工程菌PP-MS-NPm-4-16酶活性测定结果表明，在BMGY／BMMY培养基中诱导36h后酶活力可达201800u／ml，比出发菌株PP-NPm-4-2的133800u／ml提高了1.51倍，在麦芽汁培养基中，诱导36h后酶活力达209600u／ml，比PP-NPm-4-2的136900u／ml提高了1.53倍。 本研究通过表达载体信号肽的改造，构建了新型酵母表达载体，提高了植酸酶在毕赤酵母中的表达量，为植酸酶工业化生产提供了基础材料和科学依据，具有重要的学术价值和应用前景。