背景与目的近几年来，microRNAs成为分子生物学研究的热点领域，尤其是其与肿瘤发生及进展的关系越来越引起广大科学工作者的重视。microRNAs广泛存在于各类生物中。但截至目前，在所有几百种microRNAs中，仅有一小部分microRNAs得到了系统地研究。随着对microRNA研究的深入，发现microRNA突变或者异常表达与多种肿瘤发生、发展相关[1,2]。不同的microRNAs在不同的肿瘤类型中其作用也不一致。一些microRNAs表达增高或突变可以促进细胞癌基因表达增高，进而引起细胞恶性转化，因而可在癌症的诊断和治疗中起重要作用。还有一些microRNAs也可以起到抑癌基因的作用，抑制肿瘤细胞的生长、促进凋亡。因此，深入研究microRNAs的功能，有利于促进人们了解肿瘤发生、进展的分子机制，为肿瘤的治疗和预防提供理论基础。当前，利用Northern-blot和芯片可以用来确定组织特异性的microRNAs表达谱。在特定的器官中观察到的独特的microRNAs表达谱可以对肿瘤进行分类，并且确定那些可以用来估计患者预后的microRNAs标记。因此根据多种肿瘤的microRNAs表达谱特征库，可以帮助肿瘤的诊断和治疗。某些特定的microRNAs表达差异已经被证明可以用于精确的预测病人的预后。因此，microRNAs表达谱从治疗的角度可能为临床上提供一个强有力的工具用来指导治疗方案。同时，microRNAs表达谱对阐明疾病发生机制和提供新的治疗策略将发挥重要作用。而且，microRNAs的突变或异常表达以及他们所控制的通路可能成为有用的治疗靶点。microRNAs已经成为肿瘤分类、早期检测、疾病预后、制定治疗方案和治疗靶点等方面的重要工具[3-5]。白血病是造血干细胞克隆性疾病，是一组高度异质性的恶性血液病，其特点为白血病细胞异常增殖且伴有分化成熟障碍及细胞凋亡抑制。当前，白血病的病因尚不完全清楚，许多因素与其发病有关。其中病毒感染可能是主要因素，此外尚有物理、化学、遗传等综合因素。随着分子生物学的研究进展，目前，白血病的病因学已从群体医学和细胞生物学进入到分子生物学的研究领域。近几年的研究表明， microRNAs表达也与白血病发生及进展密切相关。研究发现microRNA在白血病中具有特异性表达，可以调控细胞多种转录因子的表达水平[6]。综合目前文献报道，microRNA在髓系白血病中表达异常，一些microRNA促进白血病进展[6,7]；还有些microRNA对白血病发生及进展起到抑制作用[8]。但具体表达谱及分子机制目前不清楚。本研究将临床病例分析结合白血病细胞株研究几种microRNAs在髓系白血病发病及进展中的作用。在白血病患者中同时研究几种microRNA的表达及作用，有助于深入理解microRNA与白血病发生与发展的关系。2.方法收集25例髓系白血病患者骨髓、5例正常人骨髓，利用Real Time-PCR检测8种microRNA在髓系白血病患者骨髓中的表达水平，统计分析表达差异明显的microRNA表达水平并进行后续的机制研究；合成差异显著的microRNA模拟物，进行细胞瞬时转染实验观察microRNAs对K562细胞生物学行为的影响。台盼蓝染色及MTT法观察几种microRNA对细胞增殖能力的影响；瑞氏染色观察几种microRNA对细胞分化能力的影响；Western Blot技术检测细胞增殖与分化相关标记蛋白表达水平。3.结果Real Time-PCR表明，与正常人比较， microRNA-127及microRNA-154在白血病患者中表达水平显著增高；而microRNA-185，microRNA-17-3p表达水平则显著降低。K562细胞过表达microRNA-127及microRNA-154模拟物，则显著促进K562细胞增殖。同时髓系细胞分化标志蛋白Myadm表达轻微增加。反之，当细胞过表达microRNA-185，microRNA-17-3p模拟物则抑制了K562细胞增殖能力且髓系细胞分化标志蛋白Myadm表达水平基本不变。4.结论micRNA表达与髓系白血病发病可能有关；在髓系白血病患者骨髓中microRNA-127，microRNA-154表达增高，显著促进K562细胞增殖；在患者骨髓中microRNA-185，microRNA-17-3p表达降低，抑制K562细胞增殖。microRNA-127，microRNA-154，microRNA-185，microRNA-17-3p调节K562细胞增殖的机制可能与调节Myadm表达及细胞分化有关。