近年来,水环境污染物已经受到越来越多的关注。传统的检测技术过程复杂、耗时长、价格昂贵,因此需要发展灵敏度高、反应速度快、价格低廉的检测手段。本文研究了基于在线分析仪测定2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的方法,基于TriplexTM波导芯片的荧光生物传感器同时测定双酚A(BPA)、2,4-D和微囊藻毒素-LR(MC-LR)的方法,及基于脂质体放大技术测定2,4-D的方法。这三种检测方法都是基于倏逝波原理和荧光免疫原理,快速、高灵敏度的检测污染物,并实现水中污染物的的同步、在线、实时检测。主要研究结果:(1).在线分析仪测定2,4-D的检测区间为7.1~60.1μg/L,检出限为3.8μg/L。利用在线分析仪对2,4-D抗体进行20次平行测定,结果显示传感芯片进行20次平行测量信号响应值的相对标准偏差为4.4%(<20%),说明传感芯片具有较高稳定性,可多次重复使用。本实验采用实际水样配制不同浓度的加标样品,研究本传感器系统对实际水样的检测能力。结果显示加标回收率在81%~88%之间,变异系数在6%以内;说明在线分析仪具有很好的精确度和稳定性,能够用于实际水样中2,4-D的在线实时检测。(2).基于TriplexTM波导芯片的荧光生物传感器,运用间接竞争免疫检测模式,优化并建立水环境污染物BPA、2,4-D、MC-LR的标准检测条件。经过优化后,BPA的抗体浓度是1μg/mL,2,4-D的抗体浓度是1μg/mL,MC-LR的抗体浓度是1μg/mL;进样时间为600s;预反应时间为600s。在优化的条件下测定标准曲线:2,4-D的IC50为19.06μg/L,BPA的IC50为1.010μg/L,MC-LR的IC50为2.979μg/L。2,4-D的检测区间为2.8~130.2μg/L,检测区间跨越2个数量级;BPA的检测区间为0.16~6.43μg/L,检测区间跨越2个数量级;MC-LR的检测区间为0.56~15.7μg/L,检测区间跨越3个数量级。2,4-D的检出限为0.9μg/L,BPA的检出限为0.05μg/L,MC-LR的检出限为0.18μg/L。利用十二烷基磺酸钠(0.5%SDS,pH=1.9)作为活化液,对传感芯片进行再生。连续测试20次的信号响应结果,信号值标准偏差为20%以内,表明芯片再生稳定性好,可多次重复使用。本实验分别采用饮用桶装水、自来水、清华大学荷塘水配制加标样品,研究本传感器系统对实际水样的检测能力。结果表明自来水的加标回收率在84%~116%之间,变异系数在16%以内;桶装水的加标回收率在95%~120%之间,变异系数在8%以内;荷塘水的加标回收率在83%~120%之间,变异系数在8%以内。说明本传感器具有很好的精确度和稳定性,能够用于实际水样中BPA、2,4-D、MC-LR的同时检测。(3).通过逆向蒸发法制备Cy5.5的脂质体,并用纳米粒度仪、原子力显微镜、扫描电镜等多种手段来表征制备的脂质体。结果可见,所制备脂质体为圆形或椭圆形,其粒径大小为300.9±20.7nm左右。将浓度值与荧光信号值作为横纵坐标绘制Cy5.5浓度与信号值的标准曲线。将经微柱离心法处理后收集的洗脱液于光纤仪上测定其荧光信号值,将最大值减去基线值得到的有效值带入标准曲线中,得到对应的Cy5.5浓度C0,计算得出Cy5.5的包封率为1.9%。脂质体作为放大器传感方法要经过抗体的制备、脂质体和抗体的结合、光纤的修饰等步骤。但因为时间有限,虽然做了Cy5.5脂质体作为信号放大测定2,4-D,但工作没有获得好的结果。所以建议接下来从制备脂质体的试剂比例、Cy5.5浓度、旋转蒸发时间、脂质体粒径大小等各个方面优化来增加Cy5.5脂质体的包封率。本实验建立的在线分析仪测定2,4-D、基于Triplex TM波导芯片的荧光生物传感器同时测定BPA、2,4-D、MC-LR,能够用于实际水样中BPA、2,4-D、MC-LR的同时、在线、实时检测。它们不仅能够实现水中污染物的同步、快速、灵敏检测,而且芯片再生稳定性好,可以重复利用,为环境污染事故处理和预警监控提供技术支持。