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目的通过对青岛市黄岛区胶南地区鼠、鼩精、人的汉坦病毒(Hantavirus, HV)带毒率和血清学检测并分析其结果,掌握该地区肾综合征出血热的(Hemorrhagic fever with with renal sydrome, HFRS)流行规律,并制定防制对策。方法1.HFRS病人的实验室诊断、临床特征及流行病学特征。收集由青岛市黄岛区疾控采集的2012-2013年肾综合征出血热疑似病人急性期血清标本106份,并对部分病人采集了恢复期血清,将病人的临床资料和信息等记录下来。对疑似病人急性期血清提取总RNA,根据2005年《全国肾综合征出血热监测方案(试行)》[29]设计引物,通过巢式RT-PCR法对所有鼠肺标本检测HV的M和S片段,将扩增出来的阳性片段进行测序并用MEGA 5.0软件进行同源性序列比较并构建系统发生树。同时用ELISA方法检测病人急性期和恢复期血清HV-IgM抗体和HV-IgG抗体。2.正常人血清中HV-IgG检测采集黄岛地区发病率较高地区的正常人血清,使用双抗原夹心法检测正常人血清中HV-IgG抗体,获得正常的人群血清中HV-IgG抗体阳性率。3.啮齿动物野鼠、家鼠和食虫动物鼩鼱体内HV RNA及抗体检测2012年12月-2013年11月采用夹夜法捕捉黄岛区室内和室外的啮齿动物和鼩鼱。每次获得样本后,鉴定动物种类、性别,然后解剖取肺脏,用洁净滤纸蘸取心脏血。切取肺组织,提取肺组织总RNA后使用巢式引物扩增HV的S,M片段的RNA进行测序；用75μl PBS清洗蘸取动物心脏血的滤纸片,用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测动物心脏血中的HV-IgG抗体。结果1.采集119例HFRS病人血清,其中急性期血清106份,20例病人急性期血清HV-IgM抗体阳性,阳性率为18.9%(20/106),恢复期血清90份,15例病人HV-IgG抗体阳性,阳性率为16.7%(15/90)；同时具有急性期与恢复期血清的病人共有77人,其中有18人急性期血清抗体阳性,阳性率为23.4%(18/77),有15人恢复期血清抗体阳性,阳性率为19.5%(15/77),双份血清都阳性的共有8人,阳性率为10.4%(8/77)。在106份急性期血清中,检测到存在汉滩病毒(Hataan virus, HTNV)RNA的血清2份,阳性率为1.89%。2.总共调查黄岛区正常人448名,年龄分布在16～92岁,年龄中位数60岁,男女比例为1：1.09,不同年龄组间性别分布无显著性差异。448份正常人血清中,20份抗体检测阳性,HV总抗体阳性率为4.46%(20/448)。3.2012-2013年捕获1276只啮齿动物和食虫动物,ELISA检测出253份HV感染阳性标本,血清学阳性率为19.8%。随机选取750份动物标本经RT-PCR扩增,其中30份标本HV RT-PCR阳性,其中汉城型病毒(Seoul virus, SEOV)型和HTNV型各占2.1%(15/750),其中鼩鼱带毒率为1.7%(2/121),其中褐家鼠的带毒率为0.6%(1/159),小家鼠1.4%(2/143)。结论1.青岛市黄岛区健康人群存在HV隐性感染。2.临床诊断的急性期HFRS病人确诊率较低。3.从宿主动物中扩增到30株HV的S片段,确定了青岛市黄岛区是SEOV和HTNV的混合疫区,且宿主范围广泛。