洋底深部裂褶菌生长特性及降解菲、荧蒽能力的研究

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裂褶菌是一种全球广布种,定殖于各种极端环境,目前只有南极和洋底沉积物中没有该菌的报道。基于IODP337航次岩芯样品,我们实验室已从1496mbsf、1923mbsf、1971mbsf、1993mbsf分离获得4株裂褶菌。该论文采用与陆源和海源裂褶菌菌株相比较的研究方法,揭示洋底沉积物裂褶菌的生长特性及降解利用菲、荧蒽等的能力及机理,探索洋底深部生物圈真菌的生存机理及在碳元素生物地球化学循环中的作用。取得如下主要结果:1、洋底4株裂褶菌具有相似的生长特性,最适温度为30℃,最适pH为7,最适盐度为2.92%,最适Cu2+浓度为0.064 mg/L,最佳碳源和氮源分别为木质素磺酸钠和酵母粉;相较于有氧条件,洋底裂褶菌在无氧条件下生长更好。综合分析,洋底裂褶菌的生长特性与陆源菌株CFCC 7252相似,而与海源菌株MCCC 3A00233相差较远。2、洋底裂褶菌对菲、荧蒽有较高的耐受性,在高浓度(200 mg/L)的菲、荧蒽培养基中均能生长,菌丝生长抑制率小于50%,具有降解、利用菲、荧蒽的潜力。3、裂褶菌可在菲、荧蒽作为唯一碳源的培养基上生长,除菌株24R-3-F01对菲的最适浓度为75 mg/L外,其它5株裂褶菌的最适菲、荧蒽浓度均为50 mg/L。4、裂褶菌不同菌株降解菲、荧蒽的能力存在差异,在有氧条件下,菌株15R-5-F01、CFCC 7252 和 MCCC 3A002333 对菲、荧蒽的降解率均高于6R-2-F01、20R-7-F01和24R-3-F01,在无氧条件下,菌株15R-5-F01第10d对菲、荧蒽的降解率分别为79.81%、84.42%。5、酶活检测证明裂褶菌降解菲、荧蒽主要依赖于锰过氧化物酶(MnP)、漆酶(Laccase)和木质素过氧化物酶(LiP),且这些酶产生的时间及活性因菌株和培养条件而异,其中,洋底裂褶菌在无氧条件下降解荧蒽的活性显著高于在有氧条件下的活性。6、裂褶菌降解菲、荧蒽的产物(10天后)对小麦和黄豆的发芽率无影响,对胚根的生长有一定的抑制作用,但显著低于50 mg/L的菲、荧蒽溶液处理。另外,与50 mg/L的菲、荧蒽溶液处理相比,降解产物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长的抑制作显著降低,表明裂褶菌的确能够降解菲、荧蒽类物质。7、裂褶菌降解产物的GC/MS分析结果显示,好氧条件下,菲的降解产物主要为间苯二甲醛,荧蒽的降解产物为邻苯二甲酸和三羟基环己烯;而无氧条件下菲的降解产物主要为苯酚和邻苯二甲酸,荧蒽的降解产物为1,2-二苯基乙烯。综述所述,洋底深部沉积物裂褶菌既表现出与陆源以及海源裂褶菌相似的生物学特性,又表现出一些特殊的适应无氧环境的生存能力,并能以菲、荧蒽等PAHs类物质为唯一碳源生长,表明真菌在洋底生物圈碳元素的生物地球化学循环中可能扮演重要角色。
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