FSH对配子的发生、分化、成熟及与生殖有关的行为的发生都起着重要的作用。FSH制剂可广泛的应用于动物的生殖调控,提高其繁殖潜力,也可在人类辅助生殖临床上诱导排卵,治疗生殖方面的疾病。重组FSH可避免天然激素制剂在应用过程中的不足,为FSH的高效、广泛的应用带来了契机。本研究在获得山羊FSH及其长效类似物基因cDNA序列的基础上,构建其酵母表达载体在巴斯德毕赤酵母中进行稳定的表达,为高效表达重组FSH及其长效类似物基因提供了必备的条件。根据FSH及其长效类似物基因序列和酵母表达载体的特点,设计了含有相应酶切位点和可以去掉目的基因信号肽的特异性引物,分别以pVITRO-FSHα,β-CTP,pVITRO-FSHβ-CTP-α为模板,PCR扩增获得含有特异性酶切位点的FSHα、FSHβ、FSHβ-CTP、FSHβ-CTP-α。将扩增的目的基因与载体pPIC9K和pPICZαA经限制性内切酶EcoRI和NotI双酶切后,再进行连接和转化构建含有目的基因的酵母表达载体,经PCR和测序验证正确后大提酵母表达载体。将纯化的酵母表达载体经酶切线性化后,再进行纯化和浓缩使其浓度为0.5～1μg/mL后,采用电转化的方法将含FSHα的载体分别与含有FSHβ、FSHβ-CTP的载体共转化到感受态的酵母细胞的基因组中,而含有FSHβ-CTP-α的载体单独转化到感受态的酵母细胞的基因组中;然后采用营养缺陷型的培养基、含抗生素的培养基及PCR的方法筛选阳性酵母转化子His+及高拷贝转化子,再利用MM和MD培养基筛选甲醇利用快型菌落Mut+。将His+Mut+型转化子接种于BMGY培养基获得生物量的菌体后,再用含0.5%甲醇的BMMY培养基诱导表达,每间隔24h取一次表达上清进行SDS-PAGE电泳分析及Western blot鉴定,然后用放射免疫的方法测定FSH的表达量。结果显示表达蛋白的分子量:FSHαβ约为27KD、FSHαβ-CTP约为28KD、FSHβ-CTP-α约为29KD,与预期的大小一致,FSHβ为22KD糖基化高一些,高浓度G418筛选的高拷贝转化子的表达量比低浓度G418筛选的菌落的表达量显著的高,FSH长效类似物基因的表达量显著高于FSH基因的表达量,表明CTP结构具有促进基因表达的功能。本次实验成功的构建了FSH及其长效类似物基因的巴斯德毕赤酵母表达载体,并在GS115中成功的进行了表达,为进一步开展FSH及其类似物的研究和应用奠定了基础。