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目的:目前已有研究分别发现AIM2(absent in melanoma 2)基因以及肠道菌群参与了结直肠癌的发生发展。但二者在结直肠癌的发病中是否存在关联甚至协同关系,尚不明确。本研究拟对结直肠癌患者的术前粪便标本进行16SrRNA测序以鉴定肠道菌群结构及相对丰度,并以肿瘤组织中AI M2表达情况作为分组依据,分析AIM2基因表达与肠道菌群构成是否存在相关性。方法:通过收集四川省人民医院2018年9月至2019年1月确诊为结直肠癌的住院患者的术前大便59例,病理科病理确诊的结直肠癌手术标本59例。1.通过无菌杯获取住院期间结直肠癌患者大便,要求在肠道处理4天及以上的大便或者未行肠道处理的大便,收集过程保证无菌,通过低温处理后冷藏。2.于四川省人民医院病理科获取癌组织标本,标本明确为含有癌组织且行MMR基因免疫组化实验的标本,将标本进行AIM2基因特异性免疫组化染色(EnVision法),在病理医师的帮助下判定结果,然后对各组织的AIM2染色结果进行分类和对比分析,并与患者的临床病理资料进行对比分析。3.涉及的免疫组化方法:研究采用酶标抗体法,具体是用辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HPR)与第二抗体制备成结合物,当第一抗体与待检测的底物抗原特异结合后,加入第二抗体(EnVison试剂),形成酶-多聚合化合物-第二抗体复合物,通过二氨基联苯胺(DAB)发生特异性显色反应。4.肠道菌群测序方法:通过获取术前患者大便,经行处理后提取基因组D NA,对细菌16SrRNA基因序列V4高变区进行PCR扩增,lluminaMiSeq平台上高通量测序分析。分析肠道菌群构成的比例及种类。5.通过SPSS17.0统计学软件对所有患者的临床病理资料与肿瘤组织AIM2染色结果进行数据分析,菌群测序数据采用R软件统计处理并进行数据分析。结果及结论:研究纳入的结直肠肿瘤患者共59例,男性有36例占比(61.02%),女性有23例占比(38.98%)。通过免疫组化实验对59个结直肠癌患者的病理标本经行分析,发现肿瘤组织中AIM2的表达强度在TNM分期III/IV期的患者低于I/II期患者。提示结直肠癌症组织中AIM2表达低的患者,肿瘤临床病理分期较晚,患者预后更差。通过对结直肠癌患者术前肠道菌群行16sRNA测序以及分析,发现结直肠癌患者的肠道菌群构成与正常人的肠道菌群构成不同。而结直肠癌患者AIM2高表达组与AIM2低表达组肠道菌群的菌落多样性及相对丰度相似,提示AIM2的表达与肠道菌群的总体构成无关。组间差异物种分析发现,在门水平上,厚壁菌门在AIM2高表达组中的平均丰度高于AIM2低表达组(59.1%vs 46.9%,p=0.0284);在属水平上,AIM2高表达组Blautia和Faecalibacteriium的平均丰度高于AIM2低表达组,而其消化链球菌(Peptostreptococcus)、Eisenbergiella、Tyzzerella、巨型球菌(Megasphaera)的平均丰度则低于AIM2低表达组,组间差异均有统计学意义。这提示某些细菌丰度的改变,可能与AIM2基因的表达存在相关性。