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大白菜是人们喜爱的大众蔬菜。近年来由于育种工作者的不断努力,大白菜育种已取得很大成就。但随着人口数量的不断增长,提高白菜产量,改良白菜品质仍是当前重要任务。通过分析和鉴定植物基因功能、发掘有益基因并用于育种,已成为发展趋势,因此白菜功能基因组的研究迫在眉睫。通过突变体来研究基因功能是研究基因最直接的方法之一。白菜突变体库的构建可为分析白菜基因的功能提供理想的材料,白菜突变体的构建还能获得新性状、新类型,扩大生物多样性,为遗传育种提供中间材料和新的种质资源。本实验通过农杆菌介导的遗传转化,将构建的Ac,Ds激活表达标签转化白菜中,获得转基因的植株,为突变体的构建、转基因白菜后代筛选及分离克隆相关基因奠定基础。主要研究结果如下:1.建立了高效的大白菜离体再生体系4日龄的6号大白菜高代自交系的子叶,置于诱导芽分化的培养基(MS+5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+2mg/AgNO3)上,诱导的不定芽数最多。2.构建了以质粒pUbiTs,pBi121为材料,构建了以CaMV35S强启动子启动的激活表达标签p35STs载体。3.利用农杆菌介导的遗传转化法将表达载体导入大白菜,优化了6号自交系的转化体系。(1)确定大白菜转化过程中筛选剂为卡那霉素,潮霉素,最适浓度分别为10mg/L,5mg/L。抑菌剂为羧苄青霉素,最适浓度为500 mg/L。(2)确定外植体为子叶,农杆菌最适浓度OD600=0.3,侵染时间5min,预培养36h,共培养2d。4.抗生素筛选获得的大白菜T0代转基因植株共26株,经PCR、PCR-Southern检测后得到的转基因植株共有10株。