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目的:应用小发卡状RNA（small hairpin RNA，shRNA）沉默TFF3(trefoil factor3)基因表达，探索其对人甲状腺癌乳头状癌K1细胞增殖和侵袭的影响。 方法:采用脂质体转染法将靶向TFF3基因的TFF3-shRNA瞬时转染人甲状腺乳头状癌K1细胞，使相应的基因沉默。实验设空白对照组(Con组)、阴性对照组(ConNC组)和干扰组（TFF3-shRNA组）。分别采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR、免疫细胞化学技术、蛋白质印迹法检测转染TFF3-shRNA后K1细胞中TFF3mRNA及其蛋白的表达;CCK-8实验检测三组细胞的增殖能力的改变、细胞划痕试验检测K1细胞侵袭能力变化。 结果: 1.成功将携有TFF3-shRNA基因的重组质粒Ca＃HSH018037-4-HIVmU6转染K1细胞。 2.RT-PCR和Real time-PCR检测TFF3mRNA表达，TFF3基因沉默后TFF3mRNA表达降低，是空白对照组0.380±0.110倍(p＜0.01)，阴性对照组是空白对照组的1.082倍(p＞0.05)。 3.TFF3蛋白表达:Western blot提示TFF3基因沉默后TFF3蛋白表达降低59.5％，与空白对照组比较，差异具有统计学意义(p＜0.01)。 4.免疫细胞化学染色显示TFF3蛋白位于K1细胞胞浆，与对照组相比，干扰组TFF3明显低表达。 5.细胞划痕检测K1细胞侵袭能力，干扰组（TFF3-shRNA组）K1细胞的侵袭能力减弱，划痕宽度与空白对照组比较减少57.1％,差异具有统计学意义(p＜0.01)。 6.CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力，通过生长曲线分析干扰组K1细胞生长明显慢于空白对照组细胞(p＜0.01);干扰组（TFF3-shRNA组）K1细胞在6h、12h、24h、36h、48h增殖抑制率分别为16.6％、26.6％、33.6％、33.8％、35％,与阴性对照组相比，K1细胞增殖能力减弱。 结论:TFF3基因沉默后可引起mRNA的降解、蛋白翻译水平下降，并抑制K1细胞的侵袭与增殖能力。