目的：探讨TGF—β作用大鼠近端小管上皮细胞株(NRK—52E)不同时间，α—SMA及E—Cadherin表达情况；探讨V—ATPase B亚基在TGF—β1致肾小管上皮细胞转分化中表达的变化。 方法：无血清培养NRK—52E细胞株16h—24h后，分别用TGF—β1(10ng/ml)刺激0h(正常对照组)、6h、12h、24h、48h、72h，用RT—PCR及Western Blot分别检测不同时间E—Cadherin及α—SMA mRNA和蛋白水平的表达。用细胞免疫荧光方法检测细胞E—Cadherin及α—SMA表达及分布的变化；无血清培养NRK—52E细胞株16h—24h后，分别用TGF—β1(10ng/ml)刺激0h(正常对照组)、6h、12h、24h、48h、72h，用RT—PCR和Western Blot检测V—ATPase的B1、B2亚基mRNA和蛋白水平的变化。 结果：①RT—PCR和Western blot结果显示，TGF—β1(10ng/ml)刺激后E—cadherin mRNA及蛋白水平的表达随时间延长而逐渐降低，且在刺激24h时表达已明显减弱(E—Cadherin/GAPDH: PCR扩增产物相对比值1.30±0.15 vs1.91±0.18；蛋白半定量比值3.21±0.24 vs3.76±0.15,24h vs0h，p<0.05)。免疫荧光结果也显示，正常对照组E—Cadherin在细胞膜表达完整，TGF—β1刺激组E—cadherin的表达明显降低。②RT—PCR和Western blot结果显示，TGF—β1(10ng/ml)刺激NRK—52E后，α—SMA mRNA和蛋白表达随时间延长而逐渐增强，呈时间依赖性，且在刺激24h时表达明显增强(α—SMA/GAPDH： PCR扩增产物相对比值1.05±0.16 vs0.57±0.19；蛋白半定量比值1.01±0.30 vs0.52±0.15，24h vs0h，p<0.05)。免疫荧光结果也显示，正常对照组α—SMA几乎看不到，TGF—β1刺激后胞浆内α—SMA的绿色阳性信号明显增加。③RT—PCR结果显示，TGF—β1刺激24h后，瞬时转染V—ATPase B2质粒24小时，NRK52E细胞V—ATPase B2亚基表达显著增加，表达量约为刺激组2.8倍。但抑制剂组和刺激组B2亚基的表达无显著差异。V—ATPase B2转染组TGF—β1(10ng/ml)刺激后α—SMA mRNA的表达显著降低(40.30％，p<0.05)，E—Cadherin mRNA的表达增加(1.34倍，p<0.05)；而抑制剂组TGF—β1刺激后α—SMA表达增加(18.31％，p<0.05)，同时E—Cadherin表达降低(51.36％，p<0.05)的表达。 结论：TGF—β1在诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中，V—ATPase B2亚基的表达先增高后降低，而B1亚基不受影响；过表达V—ATPase B2亚基可能抑制TGF—β1诱导的肾小管上皮细胞的转分化，而V—ATPase特异性抑制剂Bafilomycin却促进TGF—β1诱导的肾小管上皮细胞的转分化。这提示V—ATPase B2亚基抑制TGF—β1诱导的肾小管上皮细胞的转分化可能与V—ATPase的活性增强有关，这还有待于进一步研究证实。