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目的：大肠癌的发病率在我国逐年增加，其中肿瘤的侵袭和转移是病人死亡的主要原因。肿瘤的侵袭和转移是肿瘤细胞与宿主细胞、细胞外基质(ECM)之间一系列复杂的多步骤、多因素相互作用的动态过程。研究发现E-cad、TIMP-1、MMP-2和MMP-9均与大肠癌的侵袭和转移有密切关系，该四项指标与大肠癌的侵袭和转移关系均有报道，常用免疫组化技术、ELISA方法等检测，在大肠癌中E-cad低表达，而TIMP-1、MMP-2和MMP-9高表达，但在大肠癌的研究中应用该四个参数联合检测尚未见报道，MMP-2与MMP-9的相关关系研究也未见报道。本研究应用免疫组化技术检测E-cad、TIMP-1、MMP-2和MMP-9在大肠癌组织、正常肠黏膜中的表达情况，并探讨其临床意义。
方法：50例大肠癌、10例正常大肠黏膜组织，常规病理石蜡包埋。切4μm厚切片，每例4张，常规脱蜡至水；蒸馏水冲洗，磷酸盐修复液(PBS)浸泡5分钟；四种抗体均进行微波EDTA液抗原修复；3％H<,2>O<,2>去离子水孵育10分钟，以消除内源性过氧化物酶活性；加封闭用正常山羊血清，室温10分钟；加第一抗体，37度2.5小时；加第二抗体(生物素标记山羊抗兔IgG)，室温10分钟；加辣根酶标记链酶卵白素工作液，室温10分钟；0.05％DBA显色；苏木素复染，盐酸酒精脱色，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。采用已知的阳性组织切片，在同时同一条件下染色作为阳性对照，0.01mmol/L PBS代替一抗作阴性对照。光镜下棕黄色颗粒出现为阳性染色，E-cad免疫组织化学染色阳性信号定位于细胞膜和(或质)，TIMP-1、MMP-2、MMP-9免疫组织化学染色阳性信号均定位于细胞质和(或膜)。所有免疫染色结果均用盲法测定，由两位有经验的病理医师，采用双盲法，分别作出判断。每张切片在阳性表达较高区域随机选择10个高倍镜视野(×400)，连续计数至少1000个肿瘤细胞，计算阳性细胞百分比率：无阳性着色，为阴性(一)；阳性细胞数<25％，弱阳性(+)；阳性细胞数25％～75％，为阳性(++)；阳性细胞数>75％，为强阳性(+++)。
结果：1 E-cad、TIMP-1、MMP-2和：MMP-9的表达情况：E-cad在正常组织中的表达为100％，而在大肠癌组织中阳性率为60％，两者之间有显著性差异；TIMP-1、MMP-2、MMP-9在正常组织中的表达均较低，而它们在大肠癌组织中阳性率均较高，两者之间有显著性差异。
2 E-cad、TIMP-1、MMP-2和MMP-9的表达与临床病理参数的关系：
E-cad与分化程度、淋巴结转移、远隔脏器转移、Dukes分期有关，与年龄、性别、大体类型和生存期无关。分化程度低、有淋巴结转移、远隔脏器转移，E-cad表达少；Dukes分期中，C、D期患者E-cad阳性率明显低于A、B期患者。
TIMlP-1与大体类型、淋巴结转移、远隔脏器转移、Dukes分期有关，与年龄、性别、分化程度和生存期无关。在大体类型浸润型、溃疡型、肿块型中， TIMP-1表达有显著性差异；Dukes分期中，C、D期患者TIMP-1表达明显高于A、B期患者；有淋巴结转移、远隔脏器转移患者TIMP-1表达明显高于无转移患者。 MMP-2与淋巴结转移、远隔脏器转移、分化程度、Dukes分期、大体类型和生存期有关，与年龄、性别无关。在大体类型浸润型、溃疡型、肿块型中， MMP-2表达有显著性差异；在Dukes分期中，C、D期患者MMP-2表达明显高于A、B期患者；分化程度越低，MMP-2表达越强；有淋巴结转移、远隔脏器转移患者MMP-2表达明显高于无转移患者；生存期长于3年MMP-2表达明显弱于生存期短于3年患者。
MMP-9与Dukes分期、分化程度、淋巴结转移、远隔脏器转移和生存期有关，与肿瘤大体类型、年龄、性别无关。在Dukes分期中，C、D期患者MMP-9表达明显高于A、B期患者；分化程度越低，MMP-9表达越强；有淋巴结转移、远隔脏器转移患者MMP-9表达明显高于无转移患者；生存期短于3年MMP-9表达明显强于生存期长于3年患者。
3 MMP-2、MMP-9的关系： MMP-2为明胶酶A、MMP-9为明胶酶B，但经Spearman等级相关分析，它们之间无相关性(r=-0.105，P=0.466)。
4 TIMP-1和MMP-9的关系：经x<2>的线性趋势检验，它们之间无相关性(x<2>=0.038，DF=1，P=0.845)。
结论：1 大肠癌时，E-cad表达阳性率降低，TIMP-1、MMP-2、MMP-9表达阳性率升高。
2 大肠癌时，E-cad随着肿瘤的分化越低，Dukes分期越晚，有淋巴结转移、远隔脏器转移，E-cad表达阳性率越低；TIMP-1、MMP-2、MMP-9随着肿瘤的Dukes分期越晚，有淋巴结转移、远隔脏器转移等，表达越强。
3 E-cad、TIMP-1、MMP-2和MMP-9是大肠癌侵袭转移的分子标记物。