银莱汤对食积复合流感病毒感染小鼠免疫机制的研究

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背景:风温肺热病是由风热病邪犯肺,热壅肺气,肺失清肃所致,以发热、咳嗽、胸痛等为主要临床表现,相当于急性肺部炎性病变,广泛见于各种呼吸系统的急性感染性疾病中。随着抗生素的广泛使用,呼吸道感染的病原谱已发生变化,细菌感染逐渐减少,病毒感染明显上升;呼吸道病毒感染不仅造成发热、咳嗽咳痰、气喘、气急等呼吸道症状,还可影响患儿的健康及生长发育。中医药对于急性呼吸系统感染的疗效是确切的,尤其在诸如SARS、甲型H1N1流感等疫病的防治中,中医药的疗效获得了WHO的认可,且中医药具有辨证论治、治法多样、疗效确切、副作用少、标本兼顾的优势。传统认为正气不足为小儿反复呼吸道感染疾病(Recurrent respiratory tract infections,RRTI)的内因,我们发现,平素有阳明内热在其发生发展过程中也起到了重要作用,使其发病率相对较高,回顾导师谷晓红教授病例数据库从2001年建库至2012年病例统计后发现,在14岁下401例儿童的呼吸道感染病例中,属于阳明内热型的患儿占据270例,运用肺胃同治、清宣通降的治法取得显著疗效。由于此种阳明内热形成过程隐匿、进展缓慢,症状不如白虎汤证和承气汤证严重和紧急,多容易被忽略,而没有及时就医。本研究即是以此为研究对象,探索其与风温肺热病发生的相关性,并运用肺胃同清的验方银莱汤进行治疗,探索其起效机制。内容:本研究分为理论阐述、文献综述和实验研究三部分。1.理论阐述:通过查阅整理古今文献,梳理有关阳明的论述,并对导师谷晓红教授在长期临床实践中提出的“阳明内热证”、“肺胃积热证”加以阐述,并对这种状态和证型的调理治疗方法以及阳明内热证与食积化热、外感、肺热的关系做详细地阐述。2.文献综述:1)对风温肺热病的含义、病因、病机、治疗进行总结回顾;2)小儿体质与反复呼吸道感染的关系及调理体质对于预防小儿反复呼吸道感染的研究进展。3.实验研究:模拟小儿食积生热形成素体阳明内热的过程,在既往研究基础上复制食积动物模型,复合经鼻感染FM1流感病毒,形成以阳明内热为内因又发生呼吸道感染的、符合中医发病过程的动物模型,记录小鼠一般状态、饮食量、体重,通过肺组织病理切片及肺指数比较各组之间的肺功能损伤程度;通过胸腺指数、黏膜免疫球蛋白水平、血清免疫球蛋白水平、肺组织匀浆细胞因子水平评价模型对于小鼠免疫功能的影响;通过观察银莱汤对模型小鼠胸腺指数、黏膜免疫球蛋白水平、血清免疫球蛋白水平、肺组织匀浆细胞因子水平的影响,探索银莱汤的起效机制。结果:1.文献研究结果:从风温肺热病的定义、病因发病、病机演变、诊断依据、常见分型、治疗进展等方面详细地总结了近年来的研究进展,对于风温肺热病的研究还不够完善,在发病内因、治疗手段等方面仍没有较好的发展和创新,而在小儿反复呼吸道感染的辨证治疗中,病因和体质引起了医家的广泛关注,治疗上也越来越重视调理小儿体质、辨体用药和调护。2.实验研究结果:1)食积小鼠和食积复合感染小鼠于实验第二日晚开始出现活动度减少、扎堆,毛色发暗、光泽度降低,腹部膨隆,大便色棕黄、粘腻,眼部分泌物增多、甚至有睁眼不利,舌红甚至紫;实验第一至三天喂食自制高脂高蛋白饲料,饮食量少。2)通过对肺组织病理切片、肺指数、胸腺指数的观察发现,单纯感染组、食积感染组、食积感染银莱汤组均有明显的肺组织形态学的病理改变;与正常对照组比较,单纯感染组、食积感染组肺指数显著增高(P<0.05),食积感染银莱汤组肺指数显著降低(P<0.05);与正常对照组比较,单纯感染组、食积模型组、食积感染组胸腺指数均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3)黏膜免疫球蛋白、血清免疫球蛋白、肺组织匀浆中细胞因子:与正常对照组相比,单纯感染组、食积模型组、食积感染组SIgA浓度显著降低(P<0.05);食积银莱汤组SIgA浓度显著升高(P<0.05)。与正常对照组比较,单纯感染组和食积模型组血清IgM含量均有所增加,食积银莱汤组小鼠的血清IgM含量显著降低(P<0.05),食积感染组IgM含量显著降低(P<0.05),同时也显著低于单纯感染组(P<0.05),食积感染银莱汤组小鼠的血清IgM含量显著升高(P<0.05)。食积感染银莱汤组抑炎因子IL-10含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:本研究所论及的阳明定位包括胃、大肠、小肠,阳明内热是指由于多种原因导致的阳明经及胃肠的热盛状态,当遇外邪引动或者其他原因引触,而表现出相应临床症状,称之为阳明内热证,在阳明内热的基础上感受外邪引起肺热证或由阳明内热上熏引起肺热证的表现,称为肺胃积热证,应用银莱汤,肺胃同治,清宣通降,疗效颇佳。阳明内热可降低机体免疫功能,加重呼吸道感染所造成的肺损伤,使肺胃积热证小鼠胸腺指数下降更显著、肺损伤更严重、肺指数更高;并可以通过降低肺组织匀浆中SIgA水平损伤肺黏膜屏障、降低血清中IgG、肺组织中TNF-α水平而降低机体的免疫功能,并使胸腺指数显著下降,为进一步感染提供条件;肺胃积热证使肺组织中SIgA、TNF-α、 IL-10,血清IgG、IgM、IgA及胸腺指数显著降低;银莱汤可以有效提高阳明内热证小鼠胸腺指数,缓解肺胃积热证小鼠的肺损伤、降低肺指数,并可以使阳明内热所造成的免疫功能下紊乱有所改善,也可以使肺胃积热证的血清IgM、肺组织SIgA含量有所增加,肺功能损伤有所恢复。
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