基于血红蛋白的血液制品的免疫原性及安全性研究

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从生物免疫效应水平和抗原决定簇结构或性质水平探讨人血红蛋白(humanhemoglobin,hHb)、牛血红蛋白(bovine hemoglobin,bHb)、猪血红蛋白(porcine hemoglobin,prib)及其相应戊二醛聚合体免疫原特性的异同性。 在无佐剂条件下,经小鼠皮下反复注射免疫刺激剂量的特定血红蛋白或戊二醛聚合血红蛋白,家兔皮下加佐剂反复注射免疫刺激剂量的兔戊二醛血红蛋白,酶联免疫法(ELISA)半定量测定血清抗相应血红蛋白抗体(IgG)。用小鼠抗血红蛋白抗体-相应抗原交叉反应、血红蛋白氨基酸序列比较分析等方法试图揭示人、牛、猪血红蛋白抗原特异性,抗原决定簇氨基酸组成及性质。 在小鼠模型中,无佐剂存在时,经反复皮下免疫刺激注射,hHb偶尔可引起小鼠产生少量的特异性IgG抗体;bHb和pHb均未引起可测得的特异性血清(IgG)抗体。但是,无佐剂存在时,反复免疫注射hPolyHb,bPolyHb或pPolyHb,均引起明显的特异性抗体的产生。pPolyHb的免疫刺激作用弱于hPolyHb或bPolyHb,hPolyHb免疫刺激作用而与bPolyHb的相当或稍强。兔戊二醛聚合血红蛋白加佐剂皮下免疫刺激家兔,并没有使家兔产生可测出的特异性抗体。交叉反应显示,小鼠抗猪血红蛋白多克隆抗体可识别牛聚合血红蛋白,其他小鼠抗血红蛋白抗体与各种血红蛋白之间无明显的交叉反应。 戊二醛聚合血红蛋白的聚合方法没有使血红蛋白产生新的抗原决定簇,人、牛、猪血红蛋白的免疫原性在小鼠体内均很弱,其相应的戊二醛聚合体免疫原性明显增加。pPolyHb刺激小鼠IgG生成的免疫反应作用最弱,hPolyHb的IgG生成免疫刺激作用与bPolyHb无明显差异或较强。人、牛、猪血红蛋白具有相互完全独立的种属特异性抗原决定簇,牛、猪血红蛋既具有相互独立的种属特异性抗原决定簇,又具有共同的但不同于人血红蛋白的抗原决定簇。N108VLVC是人血红蛋白特有的抗原决定簇序列,其中,C112是决定此抗原决定簇种属特异性的关
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