江浙蝮蛇毒中具有抑制血小板聚集活性的蛋白质研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nieguangyi127
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蝰科与蝮科蛇毒能够以多种方式影响破坏人体血液系统的平衡.这包括造成血液中纤维蛋白及纤维蛋白浓度的降低、影响血液凝集、诱导血小板聚集、或者抑制血小板聚集.我们从江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒中经三步色谱层析技术分离纯化了一种血小板聚集抑制剂,我们将它命名为halysetin.SDS-PAGE检测结构表明halysetin分子量约为29kD,等电聚焦测得其等电点约为5.0.生物活性检测发现,该蛋白质不具有磷脂酶A<,2>及酯酶活性、无纤溶及出血活性,能抑制由胶原诱导的血小板聚集,具剂量依赖性,IC<,50>为420nM,对于ADP诱导的血小板聚集没以有明显效果.为了进一步确定该蛋白质分子的结构域组成、结构与功能之间的关系,在测定了其N端与C端的部分氨基酸序列以后,我们合成了兼并性引物,利用RT-PCR的方法从江浙蝮蛇的毒腺中克隆了其cDNA序列.该序列编码212个氨基酸.同源性比较分析表明,这是一种具有disintegrin-like/cysteine-rich双结构域的蛋白质,该蛋白质属于蛇毒金属蛋白酶(Snake Venom Metalloprotease,SVMPs)家族.
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