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第一部分、肺癌中半乳凝集素-9的表达水平及其功能 目的：研究肺癌细胞与肺癌组织中Galectin-9的表达水平，及其对肺癌细胞迁移能力的影响。 方法：应用实时荧光定量PCR方法检测6对肺癌组织与癌旁组织以及肺癌细胞A549与人永生化支气管上皮细胞16HBE中Galectin-9 mRNA的表达情况。运用Western Blot方法检测A549细胞与16HBE细胞中Galectin-9蛋白的表达情况。构建Galectin-9过表达载体，运用划痕实验检测上调Galectin-9水平对肺癌细胞A549迁移能力的影响。 结果：Galectin-9 mRNA在肺癌细胞A549中的表达低于正常细胞16HBE（p<0.001）。6对新鲜肺癌配对组织中，Galectin-9 mRNA在肺癌组织中的表达低于正常组织（p<0.01）。肺癌细胞A549中Galectin-9的蛋白水平低于正常细胞16HBE（p<0.001）。成功构建了Galectin-9过表达载体。上调A549细胞Galectin-9的表达能使其迁移能力减弱。 结论：Galectin-9在肺癌细胞以及肺癌组织中表达下调，并且其具有抑制肺癌细胞迁移的能力。 第二部分、肺癌中调控半乳凝集素-9靶microRNA的预测 目的：预测肺癌中调控Galectin-9的靶miRNA。 方法：利用生物学信息软件预测能够调控Galectin-9表达的上游miRNA,并且根据文献资料信息进行筛选。运用实时荧光定量PCR方法检测肺癌中miRNA的差异表达，对可能调控Galectin-9表达的miRNA进行进一步筛选。 结果：根据生物学信息分析以及文献资料，筛选出miRNA-296-3p、miRNA-455-5p这两种miRNA有可能会调控肺癌中Galectin-9的表达。miRNA-296-3p在肺癌细胞以及肺癌组织中高表达。miRNA-455-5p在肺癌细胞以及肺癌组织中的表达与正常对照相比无差异。 结论：miRNA-296-3p可能是肺癌中调控Galectin-9表达的潜在miRNA。 第三部分、肺癌中microRNA-296-3p调控半乳凝集素-9的验证 目的：验证miRNA-296-3p在肺癌中对Galectin-9的调控作用。 方法：利用双荧光素酶报告基因系统以及进一步上调A549中miRNA-296-3p水平，观察其对Galectin-9表达的影响以及对细胞迁移能力的影响，验证miRNA-296-3p在肺癌中对Galectin-9的调控作用。 结果：成功构建了野生型以及突变型Galectin-93’UTR荧光素酶报告基因载体。荧光素酶报告基因实验证实了miRNA-296-3p可以与Galectin-93’-UTR序列结合。转染了miRNA-296-3p mimics的A549细胞，Galectin-9的mRNA水平以及蛋白水平均表达下调，细胞迁移能力增强；与Galectin-9过表达载体共转后，则削弱了其对细胞迁移能力的促进作用。 结论：在A549细胞中，miRNA-296-3p通过与Galectin-93’-UTR结合，抑制Galectin-9的表达，进而促进细胞迁移。