3D打印PLGA/HA生物活性支架对大鼠股骨缺损修复及血清中成骨因素的影响

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目的:通过大鼠体内实验,研究运用3D打印技术制作的聚乳酸/羟基乙酸共聚物和羟基磷灰石(poly-lactic-co-glycolide/hydroxyapatite,PLGA/HA)支架在植入大鼠股骨缺损处后,对骨组织愈合的影响及其对大鼠血清中成骨相关因素的影响。方法:1、运用3D打印技术以聚乳酸/羟基乙酸共聚物以及羟基磷灰石为原材料制备PLGA/HA支架。2、在电镜下观察支架的表面形态及孔隙情况。3、选取60只6周龄雌性SD大鼠,以乌拉坦水合氯醛麻醉剂麻醉充分后沿大鼠股骨外侧皮肤切开,依次分离皮肤、筋膜、肌肉,充分暴露股骨,在近股骨头端约三分之一处做一长约4mm的全层骨缺损,深达骨髓腔,左右侧依次进行这项手术。将60只大鼠随机均分为实验组与对照组,在实验组大鼠股骨缺损处植入PLGA/HA支架,对照组不放支架,分别缝合肌肉和皮肤,石膏绷带包扎。4、分别于手术后的第3天,第1周,第2周,第3周,第4周,第5周取手术区股骨标本并取血。观察不同阶段骨缺损处骨组织愈合情况。5、对股骨标本做骨强度分析。6、通过免疫组化检测取材局部骨形成蛋白2(BMP2)的表达量。7、用血清检测试剂盒分别测定血清中钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的水平。结果:1、依靠3D打印技术成功制备了三维立体结构的支架材料。2、电镜结果表明材料表面微型空隙较多,且连通性较好。3、标本观察可见实验组骨组织愈合优于对照组,骨强度检测结果表明在第4周时实验组骨强度高于对照组(p<0.05),第五周时差异更为显著(p<0.01)。4、免疫组化结果表明在第1周、第2周、第4周骨愈合局部BMP2表达量实验组高于对照组(p<0.05)。5、血清学检测结果表明第1周、第2周、第3周实验组血清ALP水平较对照组高(p<0.05)。第3天和第1周、第2周、第3周实验组血清TRAP水平低于对照组(p<0.05),第2周时差异尤为显著(p<0.01)。第1周至第3周时间段实验组血清钙水平高于对照组(p<0.05)。血清磷水平在两组之间没有明显差异。结论:通过3D打印技术能高效打印具有多孔结构的成骨支架材料PLGA/HA,该支架植入大鼠股骨缺损处后能抑制血清中破骨因子TRAP的表达,刺激成骨因子ALP的表达,并能促进骨愈合局部BMP2的表达,促进骨组织生成,抑制骨吸收,是促进骨缺损愈合的良好材料。
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