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背景和目的：目前的研究表明，上皮来源的恶性肿瘤存在IgG或IgA等免疫球蛋白的表达，并具有相应的生物学活性。我们前期通过血清蛋白组学技术优化肿瘤抗原筛选方法，从鼻咽癌CNE-1细胞株中筛选出候选肿瘤抗原膜结合型IgM，并初步证实多种上皮来源恶性肿瘤及传代细胞系中存在IgM表达。本研究的目的包括：1、明确人鼻咽癌传代细胞系HNE-1细胞、CNE-1细胞以及人鼻咽癌组织中IgM蛋白的表达情况；2、探讨IgM表达与鼻咽癌患者临床病理特征和预后的关系；3、对鼻咽癌细胞表达IgM蛋白的生物学活性进行初步研究。方法：1、采用细胞培养、细胞爬片免疫细胞化学SABC法染色、SDS-PAGE、Western-blot、流式细胞仪间接免疫荧光法检测鼻咽癌HNE-1和CNE-1细胞中IgM蛋白的表达情况；2、采用兔抗人IgM抗体，通过免疫组化SABC法对石蜡包埋人鼻咽癌及鼻咽部炎性对照组织中IgM的表达情况进行检测，并结合临床资料和随访结果，比较分析IgM表达在鼻咽癌与鼻咽部炎性对照组织间表达差异、表达部位和特点；对IgM表达与鼻咽癌患者临床病理特征、复发和转移、生存率等关系进行探讨；采用COX回归模型对鼻咽癌患者预后影响因素进行多因素分析；3、进行鼻咽癌HNE-1细胞体外培养，应用抗人IgM抗体，设置时间梯度和浓度梯度，通过细胞增殖抑制试验(MTS法)研究抗人IgM抗体对鼻咽癌HNE-1细胞生长增殖活性的影响，并对细胞形态进行观察；通过流式细胞仪(PI染色)、Hoechst染色、TUNEL染色等方法，研究抗人IgM抗体对鼻咽癌HNE-1细胞凋亡的影响，并观察凋亡细胞形态；应用流式细胞仪PI染色法观察抗人IgM抗体对鼻咽癌HNE-1细胞细胞周期的影响。结果：1、鼻咽癌HNE-1、CNE-1传代细胞系中均存在能与抗人IgMμ链抗体发生特异性反应的蛋白，其阳性表达率分别为91.56％±1.72％和91.00％±1.79％，且IgM蛋白表达部位主要位于细胞浆，但有部分CNE-1存在细胞膜表达；鼻咽癌HNE-1和CNE-1细胞裂解液中存在与人IgMμ链分子量一致且能与抗人IgMμ链抗体发生特异性反应的蛋白，其分子量约为75KD；鼻咽癌HNE-1和CNE-1细胞IgM平均免疫荧光强度分别为10.50±0.80和6.99±0.43，与阴性对照2.29±0.31比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；2、本组鼻咽癌患者随访率为94.85％，中位随访时间为63.50月；随访期内复发率为21.74％，远处转移率为41.30％；随访期内总生存率为47.83％，无复发生存率为45.65％，无转移生存率为37.00％，其1年、3年、5年总生存率分别为93.48％、71.74％和58.66％；3、鼻咽癌组织中IgM表达阳性率为68.48％，鼻咽部炎性对照组织中IgM表达阳性率为24.00％，两者间差异显著(P＜0.05)；鼻咽癌组织中IgM表达阳性部位主要在细胞浆，且表达部位在胞浆者病理类型多为低分化鳞癌，中、高分化鼻咽癌及鼻咽部炎性对照组织中IgM表达阳性部位绝大多数位于细胞膜(P＜0.05)；鼻咽癌组织中IgM表达与临床分期和T分期呈负相关(P＜0.05)，而与年龄、性别、病程、病理分型、分化程度、淋巴结转移等无关；鼻咽癌组织中IgM表达与鼻咽癌患者局部或颈部复发、远处转移无关；鼻咽癌组织中IgM表达阳性组总生存率显著高于IgM表达阴性组(P＜0.05)，但IgM表达对鼻咽癌患者无瘤生存率的影响无统计学意义；鼻咽癌组织中IgM表达强度对鼻咽癌患者总生存率和无瘤生存率影响无统计学意义；COX回归模型分析结果显示复发和转移是鼻咽癌不良预后因素(P＜0.05)，而IgM表达不是独立的预后影响因素；4、鼻咽癌HNE-1细胞OD值和抑制率随时间或浓度的增加而增高，并在第三天或50μg／ml浓度开始出现明显抑制作用，说明抗人IgM抗体具有时间和浓度依赖性地抑制鼻咽癌HNE-1细胞增殖生长的作用(P＜0.05)，并使细胞出现相应形态学改变；抗人IgM抗体能明显促进鼻咽癌HNE-1细胞凋亡，且使鼻咽癌HNE-1细胞呈现出典型凋亡形态改变，流式细胞仪PI染色、Hoechst和TUNEL三种方法检测HNE-1细胞凋亡率分别为31.1％±2.81％、27.26％±1.69％和26.19％±2.17％，与对照组比较差异显著(P＜0.05)；抗人IgM抗体还能影响鼻咽癌HNE-1细胞细胞周期，导致G1期细胞减少，S期细胞增多，从而使细胞周期阻滞于S期(P＜0.05)。结论：1、鼻咽癌传代细胞系HNE-1和CNE-1细胞存在IgM蛋白的表达，其表达部位主要位于细胞浆，部分CNE-1细胞细胞膜也有表达；2、IgM蛋白在鼻咽癌组织中存在高表达，其表达部位与病理分化程度有关，这种表达部位的差异是否与IgM蛋白功能有关尚待进一步研究证实；3、IgM蛋白表达可能是鼻咽癌发病机制中的早期事件；其可作为判断鼻咽癌患者良好预后的有用指标；4、抗人IgM抗体能够抑制鼻咽癌HNE-1细胞增殖生长，诱导HNE-1细胞凋亡，并导致细胞周期阻滞，从而说明鼻咽癌细胞表达IgM具有生长因子样活性。