目的:探讨L-抗坏血酸应用于常温机械灌注的灌注液中的最佳浓度及对大鼠DCD供肝的缺血再灌注损伤的改善作用。方法:将24只雄性wistar大鼠随机分为静态冷保存组(static cold storage,SCS)、常温机械灌注组(normothermic machine perfusion,NMP)和L-抗坏血酸组(药物浓度梯度分组分别为1m M、2m M、5m M、10m M),每组4只大鼠。采用剪开膈肌法建立大鼠心脏死亡模型并记录时间,在心脏死亡30min后,取出大鼠肝脏,连接到大鼠肝脏体外常温携氧机械灌注系统中,灌注4h。同时设置不加L-抗坏血酸的常温机械灌注对照组与用UW液进行冷保存的对照组。在常温机械灌注过程中,分别于10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、2h、3h、4h取灌注液1ml,检测AST、ALT、LDH、-GT水平,根据酶学水平筛选最佳L-抗坏血酸浓度;并在灌注结束后取胆汁称重;在常温机械灌注或静态冷保存4h后,留取肝组织标本行HE染色,观察DCD大鼠肝组织形态;PAS染色观察DCD大鼠肝组织糖原消耗及补充情况;分别检测DCD大鼠肝组织MDA与SOD含量以及各组肝脏TNF-、IL-1、IL-6含量。结果肝脏灌注过程中酶学呈上升趋势,相同时间点各组比较,L-抗坏血酸组浓度为5m M时酶学水平最好(p<0.001);各组肝脏保存4h后的HE染色Suzuki’s病理评分,SCS组评分明显高于NMP组(p<0.01),并高于L-抗坏血酸组(p<0.001);肝脏糖原消耗SCS组最重,L-抗坏血酸组储备最丰富;各组肝脏胆汁生成没有明显统计学差异;L-抗坏血酸组肝脏SOD活力显著高于NMP组(p<0.01)与SCS组(p<0.001),MDA含量则显著低于NMP组(p<0.01)与SCS组(p<0.001);关于肝脏炎性细胞因子TNF-、IL-1β、IL-6含量比较,L-抗坏血酸组含量最少。结论:L-抗坏血酸应用于常温机械灌注的灌注液最适浓度为5m M且对大鼠DCD供肝有显著改善作用。