目的：P53是非常重要的抑癌基因。MDM2/MDMX复合物是P53通路关键的负调控因子。前期实验通过酵母双杂交找到一批与MDM2或MDMX相互作用的蛋白。本研究拟探讨其中两个具有一定临床意义及代表性的蛋白DNAJB1和UXT,在P53通路上的调控作用及其对乳腺癌的潜在影响。研究方法：1.利用免疫共沉淀、免疫荧光实验及免疫印迹实验验证DNAJB1与MDM2之间或者UXT与MDMX之间的相互作用。2.利用基因重组技术构建目标基因质粒,通过转染的方法在特定肿瘤细胞内过表达目标基因,通过免疫印迹实验验证目标基因通过MDM2或MDMX对P53通路进行的调控作用。3.以RNA干扰技术(慢病毒shRNA或者siRNA)在乳腺癌MCF7细胞内敲降目标基因,探讨其对P53通路的调控作用。4.在体外通过细胞实验、在体内通过裸鼠成瘤实验验证目标基因对肿瘤细胞生长的影响以证明其调控P53通路的细胞学效应。结果：1.DNAJB1和MDM2均定位在细胞核,DNAJB1通过其羧基端结合并在翻译后水平稳定MDM2,依赖于MDM2通过减缓其泛素化稳定P53,依赖于P53提高P21的蛋白水平,在体外和体内实验中敲降DNAJB1均可促进乳腺癌细胞MCF7的生长。2.UXT与MDMX均定位在细胞浆,UXT可以结合并稳定MDMX,可以依赖于P53影响P21的蛋白水平但该效应,过表达UXT可减低细胞中P53对DNA损伤、核糖体应激、癌基因过表达的反应,敲降UXT可以提高乳腺癌细胞MCF7中P53对多种刺激的反应。过表达UXT可以促进肿瘤细胞的生长,而敲降UXT可以抑制乳腺癌细胞MCF7的生长。结论：1. DNAJB1是一个P53依赖型的抑癌基因。2.UXT是一个P53依赖型的癌基因。