纤维素是自然界存在最广泛的糖类物质。纤维素的资源化利用为生物能源发展开辟了新途径。纤维素酶是降解与糖化纤维素唯一高效催化酶。目前已广泛应用于食品加工（如果汁提取）、饲料加工（饲料添加剂）、纺织与衣物洗涤（含酶洗涤剂）、造纸业（如废纸脱墨再利用）以及转化生物质为生物能源（如生物乙醇）等多种领域。在纤维素酶的生产技术中，利用微生物发酵产纤维素酶已成为工业制备纤维素酶的唯一方法。开发新的纤维素酶生产技术，如筛选具有新特征的纤维素酶或产酶微生物，对纤维素酶的开发和工业化应用具有重要意义。本论文首先从不同地点的土壤中分离得多株纤维素酶产生菌，通过筛选得到产纤维素酶的高效真菌并鉴定其菌属；同时考察了该菌株产酶的发酵条件；随后对获得的纤维素酶组分进行纯化，并考察其酶学性质。论文主要内容包括：实验以CMC·Na （羧甲基纤维素钠）为唯一碳源，从土壤中分离得到4株较优的纤维素酶产酶菌株。通过比较其产酶活性与菌株特性，确定一株最优纤维素酶生产菌。通过形态学和分子生物学鉴定分析，鉴定所筛选到的菌株为绿木霉Trichoderma virens，命名为Trichoderma virens ZY-01。该菌保存于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCCNo：M2012205，并申请专利，专利公开号为CN102807958A。对该菌株T. virens ZY-01的产纤维素酶的产酶条件进行考察与初步优化。其产酶最佳培养基为：酵母提取物0.1%，CMC·Na0.5%，NaCl2%，K₂HPO₄0.05%，MgSO₄·7H₂O0.05%；发酵条件为40℃发酵4d。同时发现添加Tween-80表面活性剂可促进菌株分泌纤维素酶。表面活性剂添加浓度为0.1%可获得较好的产酶效果，同未添加表面活性剂相比，发酵酶活提高约30%。随后初步开发了T. Virens ZY-01纤维素酶的分离纯化工艺。分离过程主要通包括硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和凝胶G-75层析。通过该分离纯化过程，可得到SDS-PAGE电泳级纯度的酶。该纯化过程使纤维素酶CMCase比酶活由粗酶液的0.88U/mg提高到31.5U/mg，纯化倍数为35.8倍，收率为47.04%。根据SDS-PAGE得知，CMCase活性较高的纤维素酶组分分子量约为58kDa。进一步测定表明该酶在pH5.0至6.0范围内，环境温度60℃内稳定。其最适pH为5.0，在50℃时的催化活力最强。一些金属离子如Zn²⁺、Ca²⁺和Mn²⁺对该纤维素酶的CMCase活力有激活作用，而Co²⁺和Cu²⁺则对CMCase活性有较强烈的抑制作用。本研究从自然界中筛选得到了一株新的产纤维素酶真菌T. Virens ZY-01，以往的报道中，绿木霉（T. virens）研究相对较少，且本实验中T. virens分泌纤维素酶CMCase活性较高。本研究为纤维素酶的深入研究奠定了发酵和酶学基础；对酶的反应机制研究及菌株基因工程改造具有指导作用，具有很好的工业应用前景。