【摘 要】
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论文对乙肝人免疫球蛋白(HHBIG)和狂犬人免疫球蛋白(HRIG)两种特异性免疫球蛋白的分离纯化方法进行了研究,针对亲和3号配基这样的生物大分子物质制备亲和介质所遇到的配基密
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论文对乙肝人免疫球蛋白(HHBIG)和狂犬人免疫球蛋白(HRIG)两种特异性免疫球蛋白的分离纯化方法进行了研究,针对亲和3号配基这样的生物大分子物质制备亲和介质所遇到的配基密度低的难题进行了探索。主要工作如下:(1)通过对HHBIG原料进行物性分析,确定采用亲和层析方法进行HHBIG的纯化。以琼脂糖凝胶为基质制备了用于纯化乙肝免疫球蛋白的亲和层析介质Sepharose 4FF-HHBIG,并优化了HHBIG亲和层析的操作条件。对效价为95 IU/mL的HHBIG原料,纯化倍数达到30左右;活性收率达到45%以上;对效价为45 IU/mL的HHBIG原料,纯化倍数达到40左右,活性收率达到50%以上。通过在HHBIG亲和层析单元操作中加入2%PEG D作为纯化伴侣保护HHBIG的活性,使得HHBIG的活性回收率提高10-15%。(2)以琼脂糖凝胶为基质制备了用于纯化狂犬免疫球蛋白的亲和层析介质Sepharose 4FF-HRIG,并对亲和层析条件进行了优化,对狂犬免疫球蛋白的纯化倍数在15左右,活性收率达到18%。(3)以改性PS大孔微球制备了用于纯化狂犬免疫球蛋白的新型亲和介质mPS-HRIG,并将mPS-HRIG和Sepharose 4FF-HRIG亲和介质的理化性能和层析效果进行了比较。新型mPS-HRIG亲和介质的配基密度约为Sepharose 4FF-HRIG亲和介质的两倍,mPS-HRIG亲和介质分离纯化的活性回收率和纯化倍数高于Sepharose 4FF-HRIG亲和介质,且mPS-HRIG亲和介质的机械强度高,是一种理想的分离纯化HRIG的亲和层析介质。
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