小类泛素化修饰蛋白(small ubiquitin-like modifier，SUMO)是近年发现的类泛素修饰蛋白，可通过异肽键共价连接到靶蛋白上，影响靶蛋白的生物学功能，如细胞内定位、稳定性及与其它生物大分子的相互作用等。SUMO化修饰是一个动态可逆的过程。参与SUMO化修饰的酶主要包括：SUMO活化酶、SUMO偶联酶、SUMO连接酶等。为研究SUMO化修饰酶的表达及SUMO化修饰的调节，本文分别对SUMO活化酶的两个亚基AOS1和UBA2以及SUMO偶联酶UBC9进行了表达纯化，并制备了多克隆抗体，主要研究结果如下：　　 本实验用pET28a-hUBA2(S)和pET28a-hUBC9表达质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3)，其中pET28a-hUBA2(S)表达UBA2蛋白的1-246位氨基酸。在IPTG浓度为0.1 mmol/L，37℃下诱导时间为4 h条件下，UBA2(S)大量表达；在IPTG浓度为0.05 mmol/L，37℃下诱导时间为4 h条件下，UBC9大量表达。在此基础上，利用亲和层析的方法分别纯化了变性的UBA2(S)和和非变性的UBC9。　　 利用本室保存的AOS1蛋白和本文纯化的UBA2(S)和UBC9蛋白作为抗原分别免疫新西兰兔，制成多克隆抗体。免疫印迹实验表明，抗AOS1、UBA2和UBC9的多克隆抗体能够识别原核来源的抗原，具有较高的灵敏度和较好的特异性。抗UBA2抗体还能识别原核表达的UBA2全长蛋白。此外，本文制成的抗AOS1、UBA2和UBC9的多克隆抗体能够检测真核细胞内源表达的AOS1，UBA2和UBC9蛋白。　　 本文所纯化的UBA2(S)和UBC9蛋白，可用于体外SUMO化修饰反应；所制备的抗AOS1、UBA2和UBC9的多克隆抗体为研究SUMO化修饰酶的表达及SUMO化修饰的调节积累了材料。