方剂中含有大量的化学成分,这些成分是方剂发挥临床药效的物质基础,只有阐明方剂的药效物质基础,才能进一步挖掘方剂的配伍规律及其作用机制。因此,方剂的药效物质基础研究是方剂现代研究的重点基础性工作。本课题来源于江苏省科技厅“科技基础实施建设计划”专项“江苏名医效方研究开发与评价业务建设(BM2009903)”,对龙柴方有效成分分析及药效评价进行研究。龙柴方最初来源于江苏省中医院金实教授的经验方,后经朱方石教授改良,临床用于治疗慢性乙型肝炎,已取得一定疗效。本方由龙葵、白花蛇舌草、垂盆草、柴胡、黄芩、甘草、女贞子、栀子八味药组成,既有调节免疫的中药,又有抑制肝炎病毒的中药；既具有清热解毒、调和脾胃的传统功效,又具有抗病毒、保肝、护肝的现代作用,结构严谨,君臣分明,共奏清热解毒、调和脾胃之功。本课题主要针对龙柴方的质量评价进行较系统的研究,建立其多种指标成分同时测定的质量综合评价和全面控制的方法,通过比较龙柴方合煎液与合并液中化学成分的量(成分含量)、质(成分的不同)差异,进一步揭示复方传统煎煮理论的意义及科学性。另外,通过药理实验初步分析龙柴方对慢性乙型肝炎的疗效机制。课题研究内容主要包括以下几个方面：1、文献研究综述龙柴方的相关文献,对龙柴方进行全面的文献研究。2、龙柴方组成药商品药材的质量评价龙柴方组成药商品药材的质量分析是研究龙柴方的基础,只有保证组成药的来源稳定,龙柴方的成分分析才有意义。实验采用高效液相色谱或高效毛细管电泳等方法,以各组成药中与治疗慢性乙型肝炎相关的主要活性成分为指标对商品药材进行质量评价,以确定龙柴方实验样品组成药的来源,为龙柴方有效成分的分析奠定基础。结果表明,龙柴方分别由连云港产龙葵、山西产醋柴胡、湖北产垂盆草、河北产炒黄芩、广东产白花蛇舌草、安徽产制女贞子、江西产焦栀子和内蒙古产炙甘草组成,组方制备龙柴方实验样品,供龙柴方有效成分分析及药效评价研究。3、龙柴方有效成分的分析根据龙柴方组成药商品药材的质量评价结果,以选择较优来源的各组成药配伍而成的龙柴方为研究对象,采用现代分析集成技术,对龙柴方中有效成分或指标成分进行较系统的分析,建立其多种有效成分或指标成分的HPLC、HPCE、 UPLC-Q-TOF-MS或HPLC-T-Q-MS同时测定方法及质量评价体系；并分析合煎液与合并液中各指标成分的差异。实验考虑到龙柴方目前临床以汤剂应用的特点,用ICP/MS技术分析研究龙柴方中水溶性无机元素,对探讨龙柴方临床汤剂的有效性及安全性,更具有实用价值。结果表明,龙柴方合煎液与合并液中各指标成分的含量有一定差异,基本上合煎液中指标成分的含量稍高于合并液,这可能是由于龙柴方煎煮过程中多种组成药所含成分产生的助溶作用引起的,这些变化都可能是龙柴方配伍持效(增效)作用的物质基础,这些差异同龙柴方的配伍合理性之间存在怎样的关系,以及煎煮工艺不同是否引起其药效的改变,还有待于作进一步深入研究。4、龙柴方特征指纹图谱的建立指纹图谱是建立在龙柴方组成药及其成方指标成分系统分析的基础上,用于评价中药的真实性、优良性和稳定性。指纹图谱能较为全面地反映中药所含化学成分的种类与数量,进而对中药质量进行整体描述和评价。实验针对复方组成药材货源不一的实际情况,广集龙柴方组成药不同市售商品药材饮片,随机组方,采用高效液相色谱法对龙柴方指纹图谱进行研究,对所标定的共有峰进行化学成分的归属或与组成药材的相关性分析,建立其具有特征性、重现性及普遍适用性的指纹图谱,为确保龙柴方内在质量的均一性和稳定性提供较为全面的质量控制手段。5、龙柴方药效评价通过药理实验,研究龙柴方对乙肝病毒的抑制作用和对肝细胞生长的促进作用,以阐述该方药对乙肝的作用机制。实验结果显示,龙柴方具有一定的保肝活性。