厚朴肠炎颗粒药效学及其作用机制研究

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目的 本文以厚朴肠炎颗粒为研究对象,通过溃疡性结肠炎模型的建立,研究厚朴肠炎颗粒对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及其可能的作用机理,并对其止血,镇痛,抗炎作用以及单次经口给药毒性试验进行研究,为厚朴肠炎颗粒用于溃疡性结肠炎的治疗提供可靠的药理学依据。方法 利用TNBS(三硝基苯磺酸)诱导大鼠慢性溃疡性结肠炎模型,造模成功后连续灌胃给药15d,通过对大鼠的一般活动状态的观察,疾病活动指数(DAI)和结肠损伤指数(CMDI)以及结肠组织病理观察,对厚朴肠炎颗粒治疗慢性溃疡性结肠炎效果进行评价;大鼠持续灌胃给药7天,通过血小板、PT(凝血酶原时间)、APTT(活化部分凝血活酶时间)指标的检测,观察厚朴肠炎颗粒对大鼠凝血功能作用的影响;采用二甲苯诱发小鼠耳廓肿胀试验,观察厚朴肠炎颗粒的抗炎作用;采用小鼠扭体法对厚朴肠炎颗粒的镇痛作用进行研究;并对血清中TNF-α、IL-8和IL-10水平及结肠中SOD、MDA、GSH-Px的含量等指标进行检测,研究厚朴肠炎颗粒治疗慢性溃疡性结肠炎的作用机理;采用最大给药量法进行急性毒性试验,观察大鼠濒死/死亡率、临床症状、体重、摄食量、大体剖检等指标,对厚朴肠炎颗粒进行安全性评价。结果在厚朴肠炎颗粒治疗慢性溃疡性结肠炎实验中,给药7d后,各组大鼠精神状况明显改善,毛发光泽,均无稀便,摄食增加,自主活动恢复正常。大鼠DAI评分结果显示,给药10d后,各组大鼠的DAI值均下降,其中厚朴肠炎颗粒高剂量组降低明显(P<0.05)。厚朴肠炎颗粒高、中、低剂量组给药15天后,CMDI和组织学观察评分值与模型组比较均明显降低,其中高剂量效果尤其明显;连续给药7天后,厚朴肠炎颗粒低、中、高剂量均可明显缩短APPT和提高血小板数目;厚朴肠炎颗粒对二甲苯导致的小鼠耳肿胀有一定的抑制作用,其中高剂量组与阴性对照组有极显著性差异(P<0.01);在冰醋酸引起小鼠疼痛实验中,厚朴肠炎颗粒低、中、高剂量组小鼠扭体次数和阴性组相比未见显著性差异,低剂量组在减少小鼠扭体次数上有一定作用,但作用不明显;在作用机理研究中发现,厚朴肠炎颗粒在给药15d后对血清中致炎因子TNF-α、IL-8的作用不明显,但可提高IL-10含量。而结肠组织中SOD、MDA、GSH-Px含量测定显示,厚朴肠炎颗粒高、中、低剂量可显著降低MDA含量,显著提高SOD和GSH-Px含量,并且对降低MDA和提高SOD含量上有一定的剂量效应关系;在急性毒性试验中,大鼠未发生意外死亡,供试品组的临床观察和大体剖检均未见异常。体重检测中,雄鼠d2、d3的体重增长减缓,与对照组相比,有显著性差异(P<0.05),雌鼠d3的体重明显低于对照组,且差异极显著(P<0.01)。从d7开始,雌雄鼠体重均开始恢复,d7、d14给药组体重与对照组相比,均无明显差别。摄食检测中,雌雄鼠药后第1周(d1→d8)的摄食量减少,与对照组相比,均有显著性差异,第2周(d8→d14)即恢复。结论厚朴肠炎颗粒具有明显的止血、抗炎作用,对慢性溃疡性结肠炎具有明显的疗效。作用机理研究显示,厚朴肠炎颗粒可以通过提升抗炎细胞因子IL-10的水平来控制炎症反应,并能清除机体氧自由基及提高抗氧化能力,从而减轻结肠粘膜的损伤和炎症反应,产生了明显的治疗效果。急性毒性试验显示,大鼠体重和摄食量的改变,在观察期结束完全恢复,说明单次经口灌胃给予厚朴肠炎颗粒,最大耐受量(MTD)大于32.0g/kg/天。
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