犬细小病毒病是由犬细小病毒(CPV)引起的犬的一种急性传染病，以剧烈呕吐、腹泻和血液白细胞显著减少、出血性肠炎和非化脓性心肌炎为主要特征。多发生于幼犬，病死率为10～100％，给世界各国养犬业带来了巨大的经济损失。 CPV的中和抗原表位主要位于VP2上，VP2基因全长1755bp，编码584个氨基酸，VP2蛋白是CPV的免疫原性蛋白，编码CPV的主要抗原决定簇，可诱导机体产生中和抗体。 本研究根据GeneBank已发表的CPVVP2基因序列，利用软件Primer5.0设计并合成一对引物，通过IPCR扩增出1755bp的基因片段，将其克隆到T-easy载体，构建了重组表达质粒pPICZαA-VP2，对其中的VP2进行序列测定，并将测序结果同CPV的其他几个基因变异型：CPV-d(CPV-2)、CPV-15(CPV-2a)、CPV-39(CPV-2b)、CPV-31(CPV-2c)的VP2基因进行序列比较，核苷酸同源性分别为98.95％，98.85％，98.75％，推导的氨基酸同源性分别为98.97％，98.75％，98.75％，经PCR及双酶切鉴定，目的基因正确插入pPICZαA转座载体中，利用载体特异性引物5’AOX1/3’AOX1进行PCR鉴定，结果证实成功构建重组pPICZαA-VP2。SDS-PAGE电泳结果显示，表达VP2蛋白分子量约为64.35KD，Western-bloting结果证实表达蛋白能够被CPV阳性血清识别。ELISA结果证实本试验获得的VP2重组蛋白与CPV阳性血清具有较好的反应性。 VP2蛋白在毕赤酵母系统中的成功表达为开发CPV新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等奠定了基础。