大鼠脊髓损伤致神经源性膀胱不同时期膀胱顺应性改变与形态学研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:leaffan1985
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目的:建立较为稳定的脊髓横断致神经源性膀胱大鼠模型,通过测量计算大鼠脊髓横断后6周及12周尿动力学指标,包括膀胱最大容量、逼尿肌漏尿点压及膀胱顺应性,观察大鼠膀胱重量的变化及进一步形态学分析各组膀胱壁内结构以及膀胱Cajal样间质细胞(Cajal-like interstitial cells,ICC-LC)数量的变化,探讨损伤后不同时期膀胱顺应性的病生理改变。试图发现大鼠膀胱壁组织结构及ICC-LC数量变化在脊髓损伤致神经源性膀胱发病中的作用,为明确脊髓损伤所致神经源性膀胱尤其是低顺应性膀胱的发病机制提供一定的实验依据。方法:实验使用体重为190~210g的雌性Wistar大鼠72只,随机分为四组:A组为假手术对照6周组(12只),B组为胸10节段脊髓横断6周组(24只),C组为假手术对照12周组(12只),D组为胸10节段脊髓横断12周组(24只)。两脊髓横断组(B组、D组)行大鼠脊髓T10水平完全横断,常规称重、麻醉后,大鼠俯卧位固定于鼠板,骨性标志定位T10节段脊髓,充分暴露胸椎棘突,咬骨钳破坏椎体显露脊髓5mm,眼科手术刀迅速完整离断脊髓。两对照组只暴露T10脊髓后便缝合切口。A、B组于手术后6周行尿动力学检测,C、D组于手术后12周行尿动力学检测。处死各组大鼠后膀胱取材并称重。行HE染色、Verhoeff-Van Gieson染色,分别观察膀胱壁平滑肌及纤维结缔组织(包括胶原纤维及弹性纤维)面积百分比的变化量;应用免疫荧光标记膀胱壁ICC-LC的分布。每一标本随机选定5处视野留照,并用Image pro6图像处理软件分析,最后统计分析。结果:1.我们成功建立稳定的T10节段脊髓横断大鼠神经源性膀胱模型,为后续实验提供基础。2.术后6周时,B组24只大鼠,死亡7只,存活17只;A组全部存活。12周时,D组24只大鼠,死亡6只,另有1只尿路感染伴发膀胱结石,亦不计入统计;C组全部存活。各组尿动力结果显示:B组膀胱顺应性较对照组明显升高,有统计学意义(P<0.05);D组顺应性较对照组降低,有统计学差异(P<0.05);D组(12周)顺应性明显低于B组(6周),有显著差异(P<0.01)。3.大鼠脊髓横断6周及12周大鼠膀胱的结构发生了显著改变,与同时间点对照组相比,膀胱重量均增加,且有显著差异(P<0.01);两实验组膀胱/体重比均高于各自同期对照组,有显著差异(P<0.01)。在光镜下,脊髓横断实验组尤其是12周组,逼尿肌肥大且排列紊乱,肌束间胶原纤维明显增加。12周实验组纤维结缔组织的百分含量大于6周实验组及对照组,有统计学意义(P<0.01);6周实验组纤维结缔组织百分含量也大于对照组,有统计学意义(P<0.01)。12周实验组与6周实验组相比,胶原纤维比例增加(P<0.01)但弹性纤维比例未见明显差异(P>0.05)。荧光显微镜下观察,12周实验组每个视野下平均ICC-LC数量较对照组明显增加(P<0.01);6周实验组每视野下平均ICC-LC数量较对照组减少(P<0.05),有统计学差异。结论:1大鼠T10节段脊髓损伤可致膀胱顺应性改变,即随着损伤时间延长,膀胱顺应性显示出先增高再降低的趋势。2大鼠脊髓损伤致神经源性膀胱,随着损伤时间延长,尿动力学结果显示:6周膀胱的最大容量增加、膀胱漏尿点压力增加不明显、顺应性增加;12周膀胱最大容量有所较少但仍大于对照组、逼尿肌漏尿点压力显著增加、顺应性降低。3脊髓损伤致神经源性膀胱,大鼠膀胱壁的组织学发生改变,包括肌纤维走行紊乱与结缔组织比例增加均随损伤时间延长逐渐加重;大鼠膀胱壁纤维化尤其是胶原纤维的占比可能影响膀胱顺应性的改变。4大鼠脊髓横断后膀胱壁ICC-LC数量随损伤时间变化明显,其可能参与影响膀胱顺应性的改变。
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