目的了解安徽地区高黏液表型肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药情况、耐药基因型、荚膜血清型和毒力基因。材料与方法标本来源收集2017年9月份安徽地区35家医院的肺炎克雷伯菌的非重复株698株,从中分离、筛选出不同病人来源的78株HMVKP。药敏质控菌株为肺炎克雷伯菌(ATCC700603)和大肠埃希菌(ATCC25922),均由安徽省细菌耐药中心保存。方法1、2017年9月分离自分布于安徽省24家医院的住院及门诊患者标本的78株HMVKP,留取非重复患者首次分离株。采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统和Clin-To F-Ⅱ飞行时间质谱仪进行细菌鉴定。用黏液拉丝试验来确定菌株的高黏液表型。2、参照美国临床实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standard,CLSI),用琼脂倍比稀释法测定78株菌株对17种抗菌药物的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。3、用PCR方法对耐药基因型、荚膜血清型及毒力基因进行检测。4、通过多位点序列分型技术(Multilocus Sequence typing,MLST)和脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型以及主要ST序列型同源性分析;比较分析HMVKP毒力基因rmp A阳性组与阴性组以明确两组间的分子流行病学差异。结果1、78株分离株的主要标本来源为痰,其对17种抗生素均较敏感,但对氯霉素(10.26%)、头孢曲松(5.13%)、头孢唑肟(5.13%)的耐药率稍高。2、在耐药性基因检测中发现产ESBLs菌株有四株(5.13%),其携带基因有TEM(1株)、CTX-M1(1株)和CTX-M2(2株)。有一株耐碳青霉烯酶类药物的HMVKP,其携带了IMP耐药基因。K2型(30/78,38.46%)和K1型(13/78,16.67%)为最常见的荚膜型。而检测的5种毒力基因中,以iro NB和aerobactin携带率最高,分别为91.03%和85.90%,数据分析发现了K2型菌株的毒力基因检出种类最多。3、78株HMVKP总共发现了28种ST序列型,以ST412、ST86、ST65、ST23所占比例最多;通过PFGE,其数据分析提示这4种主要克隆株分成16个型别,且部分具有同源性。另外,统计分析还发现了HMVKP的毒力基因rmp A阳性组同时携带了毒力基因kfu的几率会高于阴性组。结论1、78株HMVKP以痰标本的分离率最高,它主要来自心脑血管疾病的患者,这可能与其长期卧床而致的免疫力低下有关。逐年上升耐药率会造成临床治疗的困难,因此应充分认识到细菌的耐药问题及现状。2、HMVKP存在的强毒力荚膜血清型和多种毒力基因应引起临床高度重视。另外,应综合其表型及基因型等多方面的检测来提高对菌株感染的鉴别以便提供及时的治疗。3、安徽地区的HMVKP以K1和K2型居多。ST23、ST65、ST86、ST412为安徽地区的HMVKP较常见的ST型。4、PFGE分型显示1株K2-ST65与1株K1-ST23的相似度大于85%,3株K2-ST86与2株K2-ST65的相似度大于80%,且来自于8家医院的ST412只含两个型别。因此,应警惕医院间、不同地区间以及院内菌株的水平传播。