枇杷花药愈伤组织诱导的研究

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本研究以“大五星”枇杷(Eriobotrya japonic Lindl.)花药为材料进行离体培养技术体系的研究,着重研究了枇杷花药离体培养中诱导愈伤组织的影响因素以及花药愈伤组织诱导、增殖与分化的最佳培养基配方。其研究结果表明: 1)取材日期:10月中旬采集绿色略泛褐,横向直径约为4mm的花蕾,即花粉单核期的花药较易获得愈伤组织。 2)树龄:3年生结果树的花药有利于愈伤组织的诱导,其花药愈伤组织诱导率高于8年生结果树。 3)低温处理:低温预处理对枇杷愈伤组织诱导的作用不大,以不经过低温处理或只进行5℃低温处理3天有利于枇杷花药愈伤组织的诱导,其诱导率最高可达86.79%。 4)糖源及浓度:以蔗糖为糖源有利于枇杷花药愈伤组织的诱导,其最佳浓度为30g/L;可溶性淀粉不适合愈伤组织的诱导。 5)激素种类及配比:以MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA2.0mg/L为最佳的培养基配方,其花药愈伤组织诱导率高达90.00%。在愈伤组织诱导过程中,2,4-D起着主导作用。相同浓度的细胞分裂素6—BA和KT混合使用对枇杷花药愈伤组织的诱导率最高,其诱导率为87.62%,高于单独使用的细胞分裂素6—BA、KT和ZT。 6)增殖培养:以MS+6-BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.8mg/L和MS+NAA1.0mg/L+BA0.25mg/L为最佳的增殖培养基配方。 7)培养条件:接种的花药置于黑暗条件下培养可以提高枇杷花药愈伤组织诱导率。
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