近年来,临床上感染非结核分枝杆菌的病例不断增加,非结核分枝杆菌病已经成为危害人类生命和健康的重要问题。目前尚无治疗非结核分枝杆菌病的特效药。调节性T细胞是负向调节机体免疫反应的一类T细胞亚群,它既能够抑制机体不恰当的免疫反应,还能限定免疫应答的范围和程度。因此本试验通过对感染新金分枝杆菌的C57BL/6小鼠进行研究,分析其感染期间对Tregs亚群表型及功能的影响,使我们对非结核分枝杆菌感染期间机体Tregs亚群免疫机制有一个新的认识。本试验选取雌性C57BL/6小鼠,经腹腔注射感染新金分枝杆菌。分别于感染后1、2、3、4、5、6、7、9、11、13、16、18、23周采用流式细胞术检测脾脏CD₄⁺CD₂₅⁺Fox P3⁺Treg与CD8⁺CD₂₅⁺Fox P3⁺Treg比例变化;并用CD152检测表型变化明显的时间点检测其抑制性功能;利用免疫磁珠分选CD₄⁺CD₂₅⁺Treg与CD₄⁺CD₂₅-T细胞进行MTT增殖抑制试验;通过荧光定量PCR技术检测CD₄⁺CD₂₅⁺Treg中Fox P3、TGF-β、IL-10和IFN-γ4种细胞因子m RNA水平表达量的变化。结果显示:1、新金分枝杆菌感染的小鼠脾脏中,Tregs亚群主要以CD₄⁺CD₂₅⁺FoxP3⁺Treg表型存在,并在第6周其所占细胞比例达到最高,约占2%。CD₄⁺CD₂₅⁺CD152⁺细胞与CD₄⁺CD₂₅⁺Fox P3⁺细胞比例呈正相关。2、利用免疫磁珠分选的CD₄⁺CD₂₅-T细胞及CD₄⁺CD₂₅⁺Treg细胞纯度较高,CD₄⁺CD₂₅-T细胞为82.5%,CD₄⁺CD₂₅⁺Treg细胞可以达到79.1%。CD₄⁺CD₂₅⁺Treg对CD₄⁺CD₂₅-T细胞产生抑制性作用,CD₄⁺CD₂₅-T细胞的抑制率为89.8%。3、CD₄⁺CD₂₅⁺Treg分泌的FoxP3、IL-10与TGF-β的mRNA相对表达量均与对照组差异显著,IFN-γm RNA表达量与对照组无统计学差异。综上,新金分枝杆菌感染小鼠脾脏Tregs亚群主要以CD₄⁺CD₂₅⁺Fox P3存在,发挥其免疫抑制作用。体外增殖抑制试验中,CD₄⁺CD₂₅⁺Treg能够抑制CD₄⁺CD₂₅-T细胞的增殖作用,验证了CD₄⁺CD₂₅⁺Treg能够通过直接接触发挥抑制性功能。CD₄⁺CD₂₅⁺Treg细胞主要通过分泌细胞因子TGF-β与IL-10来发挥其免疫抑制作用。