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目的在引起伤寒、副伤寒的病原中,甲型副伤寒沙门菌所占的比例逐渐升高。我国每年均有不同程度的地方性甲型副伤寒流行及暴发。针对甲型副伤寒沙门菌引起的感染,通常采用全血细菌分离培养,耗时较长,且分离率较低,难以满足临床或突发公共卫生事件快速诊断及鉴别诊断的需要。加之目前已有血清学诊断方法的特异性较差、敏感性较低,使研究发展快速检测甲型副伤寒沙门菌感染的技术及方法成为必需。另外,由于现在还没有针对甲型副伤寒沙门菌的疫苗,所以迫切需要甲型副伤寒沙门菌快速检测的方法和能刺激机体免疫系统产生抗体的抗原蛋白。本研究旨在筛选甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白中具有免疫原性的蛋白抗原,用于甲型副伤寒沙门菌的早期诊断;同时筛选出具有良好免疫保护性的蛋白,作为候选疫苗的靶标。方法提取8株临床分离的甲型副伤寒沙门菌的外膜蛋白,利用双向电泳进行分离,转移至PVDF膜上,与病人的血清进行蛋白印迹杂交筛选、鉴定出有强免疫性的蛋白质。并利用pET24b、pET30a和pET51b三种载体,将筛选得到的蛋白在原核系统中进行表达、纯化后,用病人血清进行蛋白印迹杂交,验证蛋白的免疫性。结果筛选到了20个具有免疫性的蛋白点,经MALDI-TOF-MS鉴定,代表了7种蛋白,分别为早期蛋白OmpX、TolC、SdhB和MetQ,恢复期蛋白OmpA、AcrA和LldD蛋白质。7个蛋白均能在BL21(DE3)中大量表达。用47份甲型副伤寒病人血清与7个纯化后的抗原进行杂交,其中47份(100%)能与LldD、AcrA、SdhB杂交,46份(97.87)能与OmpA、OmpX杂交,45份(95.47)能与TolC杂交,37份(78.72%)能与MetQ杂交。结论本研究从甲型副伤寒沙门菌中筛选到了7个抗原蛋白,包括OmpA、AcrA、LldD、OmpX、TolC、SdhB和MetQ,并在体外获得了大量表达,纯化后用病人血清验证了其免疫反应性,有潜力成为早期诊断、药物及疫苗的靶位。