狗枣猕猴桃离体快繁的研究

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本研究以长白山狗枣猕猴桃(Actinidia kolomikta(Rupr.)Maxim.)为试验材料,通过对野生叶片和再生培养得到的试管苗的叶片、叶柄和茎段进行组织培养,研究其离体快繁体系。本文对叶片灭菌方法,外植体愈伤组织诱导与分化,带腋芽茎段诱导培养,继代增殖培养,愈伤组织和增殖培养的继代周期和继代次数,生根培养和炼苗移栽进行了系统分析,找出培养各阶段的最佳植物生长调节剂组合和培养条件。结果如下:1.狗枣猕猴桃的最佳灭菌方法:0.1%升汞灭菌4min。污染率为25%,成活率为45%。2.叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+ZT1.0mg/L+NAA0.2mg/L,出愈率为91.67%。培养基MS+ZT2mg/L+IBA0.2mg/L为狗枣猕猴桃愈伤组织分化的最佳培养基,分化率为89.45%,出芽力为8.11。3.再生植株的叶片、叶柄、茎段的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+ZT1.0mg/L+IBA0.2mg/L,茎段是狗枣猕猴桃诱导愈伤组织的最佳外植体,出愈率为98.07%。4.叶尾的出愈率和分化率最高,其次是叶尖,全叶最低,0.5-1.0cm、1.0-1.5cm大小叶片叶尾的出愈率最高,为100%,1.5-2.0cm大小叶片叶尾的分化率最高,为90.94%。5.带腋芽茎段的最佳诱导和增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,萌发率达到100%,萌发数量为3.75。6-BA对腋芽的萌发效果好于ZT。6.狗枣猕猴桃继代增殖培养的最佳培养基是MS+6-BA3.0mg/L+IBA0.2mg/L+蔗糖30g/L,增殖系数可达5.82以上。7.愈伤组织继代培养以40d为继代周期培养到第4代为佳;继代增殖培养以40d为继代周期培养到第5代效果最好,变异苗少。8.瓶内生根的最佳培养基是1/2MS+IBA0.6mg/L,生根率达到100%,平均根数达7.96,平均根长为3.70;用0.5mg/mLIBA浸泡过的试管苗的生根率和成活率最高,分别为64.98%和59.94%。9.组培苗在基质V(田园土):V(草炭):V(沙子)=1:1:1上,移栽成活率最高,为92%;半遮阴处理有利于组培苗移栽成活。
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