CDH4基因对涎腺腺样囊性癌细胞增殖和侵袭能力的影响

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涎腺腺样囊性癌是口腔常见的肿瘤,易于血行转移和浸润神经。该肿瘤易复发且病人的晚期生存率较低,5年生存率77.1%和10年生存率37.4~47.8%,目前尚无有效的防治措施。本研究拟从分子水平入手,寻找相关的靶基因,为疾病的预防和治疗提供支持。  目的:在前期实验研究基础上,进一步研究CDH4基因的表达对涎腺腺样囊性癌增殖和侵袭能力的影响。  方法:第一部分,用针对CDH4设计的siRNA转染SACC-M细胞,干扰CDH4基因在该细胞中的表达。实验分为三组:CDH4siRNA-1390组,CDH4siRNA-2122组,N.C.siRNA对照组。siRNA转染后RT-PCR检测CDH4基因RNA的表达,通过平板克隆形成实验、CCK8试剂盒增值曲线测定实验以及裸鼠皮下成瘤实验来观察CDH4基因表达量下调之后细胞增殖情况的改变。  第二部分,用针对CDH4设计的siRNA转染SACC-M细胞,通过有包被和未包被的侵袭小室,来观察CDH4基因表达量下调后细胞侵袭和迁移能力的改变。  结果:第一部分RT-PCR结果显示,转染48h后,在RNA水平,与阴性对照相比,干扰的两组CDH4基因表达量明显下调,通过平板克隆形成实验显示:CDH4基因表达量下调后,SACC-M细胞平板克隆形成数较N.C.siRNA对照组明显减少;增殖曲线测定实验显示:CDH4基因表达量下调后,SACC-M细胞的增殖曲线在N.C.siRNA对照组增殖曲线之下;裸鼠皮下成瘤实验显示:CDH4基因表达量下调后,SACC-M细胞在裸鼠皮下成瘤体积较N.C.siRNA对照组小。  第二部分侵袭小室迁移实验显示:CDH4基因表达量下调后,SACC-M细胞穿过小室的数目较N.C.siRNA对照组少;侵袭小室侵袭实验显示:CDH4基因表达量下调后,SACC-M细胞穿过小室的数目较N.C.siRNA对照组少。  结论:CDH4基因对涎腺腺样囊性癌的增殖、侵袭和转移起到促进作用,继续进一步的研究和探讨,为今后对该疾病的监测和基因治疗起到重要作用。
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