脊髓损伤包括原发性损伤及由此而诱发的继发性损伤。迄今为止，原发性损 伤导致的脊髓损害尚无有效的治疗方法，因此继发性脊髓损伤成为研究的焦点。 近年来发现强啡肽（Dyn）作为一种重要的内源性阿片肽除参与对镇痛、心血管活 动、呼吸、垂体分泌及免疫功能的调节作用外，还参与了中枢神经系统的继发性 损伤作用，但目前对Dyn作用机理的研究报道较少。近期研究提示Dyn致脊髓损 伤作用除与阿片受体有关外，可能还存在非阿片的途径，它的非阿片途径可能与 兴奋性氨基酸（EAA）及其受体有关。因此，本研究深入地探讨Dyn的作用机制 及与EAA、NMDA受体的关系，为临床治疗脊髓继发性损伤提供实验依据。 本研究采用改良的Yalsh和 Rudy法建立蛛网膜下腔插管、注药模型，通过 高效液相分析系统测定不同种类、剂量Dyn对脊髓组织EAA含量变化的影响，借 助行为学观察、电生理、组织病理、酶组织化学、免疫组织化学等技术方法，结 合计算机图象定量分析系统，研究κ受体桔抗剂nor-BNI或兴奋性氨基酸NMDA 受体拮抗剂MK－801对Dyn致大鼠SCI作用的影响，结果显示： 1．鞘内注射Dyn使脊髓组织中EAA含量显著增加，在DynA（1-13）100nmol 时Glu和Asp的增加达到高峰，其增加的量与 DynA（1-13）剂量有关，与Dyn 的种类无关，且不受阿片受体拮抗剂影响。 2．行为学观察显示：大鼠Dyn鞘内注射后各时间段出现以Tarlov功能评分 下降和Rivlin斜板临界角变化增大为表现的运动功能损害。nor-BNI和MK-801 干预后，运动功能在1、3天亦有下降，7、14大明显恢复，与单纯注射Dyn组 相比差异显著。nor－BNI＋Dyn及MK－801＋Dyn组间无显著差异。 3．电生理监测显示：蛛网膜下腔注入Dyn后各时间组MEP、SEP均有不同程 度潜伏期延长、波幅降低，而鞘内联合注入nor-BNI及MK-801后，波幅及潜伏 2 第二军医大学硕士学位论文 骨科专业 期在1、3天时亦有类似改变，与单纯注射Dyn组无显著差异。而在7、14天变 化减小，部分动物表现接近正常，均明显优于Dyn组。 4．组织学和免疫组化结果：大鼠蛛网膜下腔注射30nmolDynA＊习3）后3天， 脊髓组织破坏，前角神经元数目减少，脱P活性增强：14天时，MP活性下降， GFAP阳性细胞增多，神经胶质增生明显。nor－BNI＋Dyn和MK－801＋Dyn组在注药 后3天时，脊髓灰、白质破坏减少，ACP活性轻度增强，与单纯Dyn相比差异显 著。14天时GFAP阳性细胞无明显增多，nor－BNI＋Dyn与MK－801＋Dyn组间比较， 在统计学上无显著意义。 上述结果证实，Dyn注入蛛网膜下腔后，可引起大鼠脊髓损伤，同时伴有脊 髓组织EAA含量的升高，阻断KaPPa阿片受体或兴奋性氨基酸NMDA受体后，Dvn 的脊髓损伤作用可部分缓解。 总之，Dyn作为继发性脊髓损伤的关键因子之一，过度增多可导致脊髓损伤， 其可能的作用机制包括Kappa阿片受体和EAA－NMDA受体介导的阿片和非阿片两 种途径。