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目的:各种原因引起的气管创伤或病变,造成气管狭窄。气管狭窄治疗至今仍是十分困难,手术治疗对气管瘢痕成熟区疗效显著,而药物治疗在早期预防气管狭窄有着积极的作用。羧甲基壳聚糖(Carboxymethyl Chitosan)是一种多糖,其由壳聚糖经羧甲基化而得,羧甲基基团具有强亲水性,使其有更好的生物降解性及组织相容性,有止血、止痛和抑制微生物生长的作用。此外,可促使上皮细胞生长、抑制Fb增殖和迁移,达到抑制瘢痕组织形成的作用,从而加速创面愈合。本课题通过利用球形电极电凝器灼烧法建立兔气管狭窄,以及在气管狭窄模型的基础上雾化吸入羧甲基壳聚糖,通过病理形态学研究,并进行比较,研究羧甲基壳聚糖雾化吸入对气管纤维化的抑制作用。方法:1、第一部分以成年新西兰大白兔22只随机分成实验组(n=12)和对照组(n=10)。实验组和对照组均行10-12环气管切开术,实验组用球形电极电凝器(20w)烧灼内壁5s,而对照组不做处理,均用单丝线缝合气管。在术后第7天、14天和28天喉气管镜下观察气管,之后处死动物,取材后观察上段气管,HE及MASSON染色后进行观察。2、第二部分将成年新西兰大白兔20只随机分成吸入药物组(n=10)和吸入盐水组(n=10)。两组气管狭窄模型建立后,吸入药物组雾化吸入羧甲基壳聚糖,吸入盐水组雾化吸入生理盐水。在第14天和第28天喉气管镜下观察气管瘢痕形成。在第28天处死全部动物,取喉、上段气管观察,HE及MASSON染色后显微镜下观察,通过雾化吸入羧甲基壳聚糖对气管创伤后纤维化的作用;扫描电镜观察雾化吸入羧甲基壳聚糖对气管粘膜影响;心、肝、脾、肺和肾的HE染色观察雾化吸入羧甲基壳聚糖对全身影响。3、第三部分将第二部分取得标本进行免疫荧光抗体染色及ELISA检测气管组织TGF-β1的表达水平和蛋白表达。结果:1、第一部分研究结果显示:喉气管镜检查,术后第14天气管灼烧处可见明显的肉芽组织及瘢痕增生,气管切开缝合处通畅,无肉芽组织及瘢痕增。第28天气管灼烧处瘢痕挛缩和软骨畸形愈合,可见明显狭窄环,狭窄度范围44%-62%,中位数为55%。至术28天,电凝烧灼组气管狭窄程度逐渐增大。第28天气管狭窄度高于灼烧后第7天,差异具有统计学意义(P<0.05)。HE染色和MASSON三色染色方法结果可见,术后第28天,粘膜下轻度炎症反应,并且无柱状上皮再生。肉芽组织被致密的胶原纤维替代,损坏的软骨被胶原纤维牵拉挛缩。2、第二部分研究结果显示:喉气管镜下检查,术后第28天吸入盐水组狭窄度高于吸入药物组,有统计学意义(P<0.05)。气管CT平扫可见吸入药物组兔气管左右横径大于吸入盐水组兔气管左右横径,有统计学意义(P<0.05)。HE染色和MASSON染色见吸入药物组少量胶原纤维,表面可见疏松结缔组织,损坏的软骨形态完整,未见明显损伤及牵拉敬痉挛。吸入药物组比吸入盐水组羟脯氨酸含量低(P<0.05)。HE染色心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏组织及未建立处气管扫描电镜未发现异常。3、第三部分研究结果显示:吸入盐水组与吸入药物组相比,吸入盐水组TGF-β1表达阳性纤维细胞明显高于吸入药物组TGF-β1表达阳性纤维细胞。吸入药物组比吸入盐水组TGF-β1蛋白表达量低(P<0.05)。结论:1、球形电极电凝器可导致兔气管狭窄,可利用球形电极电凝器建立气管狭窄模型,方法简单易行。2、提示雾化吸入羧甲基壳聚糖对气管纤维化有抑制作用。3、雾化吸入羧甲基壳聚糖对气管创伤后纤维化抑制作用可能与TGF-β1有关。