【摘 要】
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该研究的目的在于:(1)克隆小鼠免疫球蛋白超家族中新型抑制性受体DIgR2 cDNA,明确其基因组结构并进行染色体定位;(2)明确DIgR2的组织分布和在各种免疫细胞中的表达调控模式,
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该研究的目的在于:(1)克隆小鼠免疫球蛋白超家族中新型抑制性受体DIgR2 cDNA,明确其基因组结构并进行染色体定位;(2)明确DIgR2的组织分布和在各种免疫细胞中的表达调控模式,预测其功能;(3)进行原核和真核表达,研究其生物学性质;(4)以DC为细胞模型,初步探讨DIgR2的免疫学功能.该实验首先利用小鼠EST数据库从中拼接出一个具有Ig结构域的新分子,在公共基因数据库登录(序列号:AF251703).用特异性引物从小鼠骨髓来源的DC中克隆得到其全长序列,命名为DIgR2;分析显示该分子是一免疫球蛋白超家族中的I型跨膜糖蛋白,胞内区段含有两个ITIM特征结构;其基因组由7个外显子构成,定位于11号染色体;同源分析显示其与DIgR1、CMRF-35H、CMRF-35A、pIgR的V1和V4区有较高的相似性.Northern、RT-PCR分析提示DIgR2广泛表达在正常组织中,但表达丰度很低,除在单核巨噬细胞系未检测到表达信号外,在各种造血细胞系和部分肿瘤细胞系均有不同程度的表达.在RT-PCR分析过程中克隆到了DIgR2的一个剪切变异体,将之命名为DIgR2V.原核表达DIgR2蛋白后制备、纯化了抗DIgR2的多克隆抗体.
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